Ẹ ṣeun fún ṣíbẹ̀wò sí Nature.com. Ẹ̀yà ẹ̀rọ ìṣàwárí tí ẹ ń lò ní àtìlẹ́yìn CSS díẹ̀. Fún àwọn àbájáde tó dára jùlọ, a gbà yín nímọ̀ràn láti lo ẹ̀rọ ìṣàwárí tuntun (tàbí kí ẹ má baà mú ipò ìbáramu ṣiṣẹ́ ní Internet Explorer). Ní àkókò yìí, láti rí i dájú pé àtìlẹ́yìn ń bá a lọ, a ó máa fi ojú-ọ̀nà náà hàn láìsí àwọn àṣà àti JavaScript.
Ìdásílẹ̀ àwọn àpẹẹrẹ ẹranko ti ìyípadà modic (MC) jẹ́ ìpìlẹ̀ pàtàkì fún kíkẹ́kọ̀ọ́ nípa MC. A pín àwọn ehoro funfun mẹ́rìnléláàádọ́ta ní New Zealand sí ẹgbẹ́ iṣẹ́-abẹ sham-operation, ẹgbẹ́ ìfàmọ́ra iṣan (ẹgbẹ́ ME) àti ẹgbẹ́ ìfàmọ́ra nucleus pulposus (ẹgbẹ́ NPE). Nínú ẹgbẹ́ NPE, a fi ọ̀nà iṣẹ́-abẹ anterolateral lumbar hàn disiki intervertebral àti abẹ́rẹ́ kan láti gún ara ẹ̀gbẹ́ L5 nítòsí àwo ìparí. A fa NP jáde láti inú disiki intervertebral L1/2 nípa lílo syringe a sì fi sínú rẹ̀. Lílo ihò kan nínú egungun subchondral. Àwọn ìlànà iṣẹ́-abẹ àti àwọn ọ̀nà lilu nínú ẹgbẹ́ ìfàmọ́ra iṣan àti ẹgbẹ́ iṣẹ́-abẹ sham-operation jẹ́ ọ̀kan náà gẹ́gẹ́ bí àwọn tí ó wà nínú ẹgbẹ́ ìfàmọ́ra NP. Nínú ẹgbẹ́ ME, a gbé apá kan ti iṣan sínú ihò náà, nígbà tí ó wà nínú ẹgbẹ́ iṣẹ́-abẹ sham-operation, kò sí ohun tí a gbé sínú ihò náà. Lẹ́yìn iṣẹ́-abẹ náà, a ṣe àyẹ̀wò MRI àti ìdánwò molecular biological. Àmì nínú ẹgbẹ́ NPE yípadà, ṣùgbọ́n kò sí ìyípadà àmì tí ó hàn gbangba nínú ẹgbẹ́ iṣẹ́-abẹ sham-operation àti ẹgbẹ́ ME. Àkíyèsí nípa ìtàn ara fihàn pé a rí ìdàgbàsókè àsopọ tí kò dára ní ibi tí a ti gbé e kalẹ̀, àti pé ìfarahàn IL-4, IL-17 àti IFN-γ pọ̀ sí i nínú ẹgbẹ́ NPE. Gbígbé NP sínú egungun subchondral lè ṣẹ̀dá àpẹẹrẹ ẹranko ti MC.
Àwọn ìyípadà Modic (MC) jẹ́ àwọn ọgbẹ́ ti àwọn àtẹ̀gùn ẹ̀yìn àti egungun tí ó wà ní ẹ̀gbẹ́ tí a lè rí lórí àwòrán ìfàmọ́ra magnetic resonance (MRI). Wọ́n wọ́pọ̀ gan-an nínú àwọn ènìyàn tí wọ́n ní àwọn àmì àrùn tí ó so mọ́ ara wọn1. Ọ̀pọ̀lọpọ̀ ìwádìí ti tẹnu mọ́ pàtàkì MC nítorí ìbáṣepọ̀ rẹ̀ pẹ̀lú ìrora ẹ̀yìn kékeré (LBP)2,3. de Roos et al.4 àti Modic et al.5 kọ́kọ́ ṣàlàyé oríṣiríṣi àwọn àìlera àmì subchondral mẹ́ta nínú egungun egungun ẹ̀gbẹ́. Àwọn ìyípadà Modic type I jẹ́ hypointense lórí àwọn ìtẹ̀lé T1-weighted (T1W) àti hyperintense lórí àwọn ìtẹ̀lé T2-weighted (T2W). Ìpalára yìí ń fi àwọn ìtẹ̀lé fissure hàn àti àsopọ granulation iṣan tí ó wà ní ẹ̀gbẹ́ nínú egungun ẹ̀gbẹ́. Àwọn ìyípadà Modic type II ń fi àmì gíga hàn lórí àwọn ìtẹ̀lé T1W àti T2W. Nínú irú ọgbẹ́ yìí, a lè rí ìparun àtẹ̀lé, àti ìyípadà histological fatty ti egungun tí ó wà ní ẹ̀gbẹ́. Àwọn ìyípadà Modic type III ń fi àmì kékeré hàn nínú àwọn ìtẹ̀lé T1W àti T2W. Àwọn ọgbẹ́ Sclerotic tí ó bá àwọn ìtẹ̀lé endplates mu ni a ti rí6. A kà MC sí àrùn tí ó ń fa àrùn ọpọlọ nínú ọpa ẹ̀yìn, ó sì ní í ṣe pẹ̀lú ọ̀pọ̀lọpọ̀ àrùn tí ó ń fa àrùn ọpọlọ nínú egungun ẹ̀yìn7,8,9.
Ní gbígbé àwọn ìwádìí tó wà yẹ̀ wò, ọ̀pọ̀lọpọ̀ ìwádìí ti fúnni ní òye tó kún rẹ́rẹ́ nípa ìdí àti àwọn ọ̀nà ìṣègùn MC. Albert àti àwọn ẹlòmíràn dámọ̀ràn pé ìfọ́ disiki lè fa MC8. Hu àti àwọn ẹlòmíràn sọ pé ìfọ́ disiki tó le koko ni MC fà10. Kroc dámọ̀ràn èrò “ìfọ́ disiki inú,” èyí tó sọ pé ìfọ́ disiki tó ń tún ara ṣe lè fa ìyẹ̀fun nínú àwo ìparí. Lẹ́yìn ìṣẹ̀dá ìfọ́, ìparun àwo ìparí láti ọwọ́ nucleus pulposus (NP) lè fa ìdáhùn autoimmune, èyí tó tún ń yọrí sí ìdàgbàsókè MC11. Ma àti àwọn ẹlòmíràn jọra, wọ́n sì ròyìn pé autoimmunity tí NP fà ń kó ipa pàtàkì nínú ìṣẹ̀dá MC12.
Àwọn sẹ́ẹ̀lì ètò ààbò ara, pàápàá jùlọ àwọn sẹ́ẹ̀lì lymphocytes olùrànlọ́wọ́ CD4+ T, kó ipa pàtàkì nínú ìṣẹ̀dá ara-ẹni13. Ẹ̀yà Th17 tí a ṣẹ̀ṣẹ̀ ṣàwárí ń mú cytokine proinflammatory IL-17 jáde, ó ń gbé ìṣàfihàn chemokine lárugẹ, ó sì ń ru àwọn sẹ́ẹ̀lì T sókè nínú àwọn ẹ̀yà ara tí ó ti bàjẹ́ láti mú IFN-γ14 jáde. Àwọn sẹ́ẹ̀lì Th2 tún ń kó ipa àrà ọ̀tọ̀ nínú ìṣẹ̀dá ara-ẹni tí ó ń ṣe àtúnṣe ara-ẹni. Ìfihàn IL-4 gẹ́gẹ́ bí sẹ́ẹ̀lì Th2 tí ó dúró fún ara lè yọrí sí àwọn àbájáde immunopathological líle koko15.
Bó tilẹ̀ jẹ́ pé ọ̀pọ̀ ìwádìí ìṣègùn ni a ti ṣe lórí MC16,17,18,19,20,21,22,23,24, síbẹ̀ àìsí àwọn àpẹẹrẹ ìwádìí ẹranko tó yẹ tí ó lè fara wé ìlànà MC tí ó sábà máa ń ṣẹlẹ̀ nínú ènìyàn, tí a sì lè lò láti ṣe ìwádìí lórí ìdí tàbí àwọn ìtọ́jú tuntun bíi ìtọ́jú tí a fojú sí. Títí di òní, àwọn àpẹẹrẹ ẹranko díẹ̀ ti MC ni a ti ròyìn láti ṣe ìwádìí lórí àwọn ìlànà àrùn tó wà ní ìpìlẹ̀.
Ní ìbámu pẹ̀lú ìmọ̀ nípa agbára ìdènà àrùn tí Albert àti Ma dábàá, ìwádìí yìí dá àwòṣe ehoro MC tí ó rọrùn tí ó sì lè tún ṣe àtúnṣe sílẹ̀ nípa lílo NP lẹ́gbẹ̀ẹ́ àwo ìsàlẹ̀ egungun tí a gbẹ́. Àwọn ète mìíràn ni láti kíyèsí àwọn ànímọ́ ìtàn-ẹ̀rọ ti àwọn àpẹẹrẹ ẹranko àti láti ṣe àyẹ̀wò àwọn ìlànà pàtó ti NP nínú ìdàgbàsókè MC. Láti ṣe èyí, a lo àwọn ọ̀nà bíi molecular biology, MRI, àti histological studies láti kẹ́kọ̀ọ́ nípa ìlọsíwájú MC.
Àwọn ehoro méjì kú nítorí ẹ̀jẹ̀ tí wọ́n ń ṣẹ̀ ní àkókò iṣẹ́-abẹ, àti àwọn ehoro mẹ́rin kú nígbà tí wọ́n ń lo oògùn amúniláradá nígbà tí wọ́n ń lo MRI. Àwọn ehoro 48 tó kù ló yè, wọn kò sì fi àmì ìwà tàbí àmì ọpọlọ hàn lẹ́yìn iṣẹ́-abẹ náà.
MRI fihàn pé agbára àmì ti àsopọ tí a fi sínú ihò ọ̀tọ̀ọ̀tọ̀ yàtọ̀ síra. Ìwọ̀n àmì ti ara L5 vertebral nínú ẹgbẹ́ NPE yípadà díẹ̀díẹ̀ ní ọ̀sẹ̀ 12, 16 àti 20 lẹ́yìn ìfisí (ìtẹ̀lé T1W fi àmì kékeré hàn, àti ìtẹ̀lé T2W fi àmì adalu àti àmì kékeré hàn) (Àwòrán 1C), nígbà tí ìfarahàn MRI ti àwọn ẹgbẹ́ méjì mìíràn ti àwọn ẹ̀yà tí a fi sínú wà ní ìdúróṣinṣin ní àkókò kan náà (Àwòrán 1A, B).
(A) Àwọn MRI ìtẹ̀léra tí a ṣe àfihàn ti ẹ̀yìn egungun ní àkókò mẹ́ta. A kò rí àwọn àìlera àmì nínú àwọn àwòrán ẹgbẹ́ iṣẹ́ abẹ. (B) Àwọn ànímọ́ àmì ti ara ẹ̀yìn nínú ẹgbẹ́ ME jọra sí àwọn tí ó wà nínú ẹgbẹ́ iṣẹ́ abẹ, a kò sì rí ìyípadà àmì pàtàkì ní ibi tí a fi sínú rẹ̀ lórí àkókò. (C) Nínú ẹgbẹ́ NPE, àmì ìsàlẹ̀ hàn gbangba nínú ìtẹ̀léra T1W, àti àmì àpapọ̀ àti àmì ìsàlẹ̀ hàn gbangba nínú ìtẹ̀léra T2W. Láti àkókò ọ̀sẹ̀ 12 sí àkókò ọ̀sẹ̀ 20, àwọn àmì gíga tí ó yí àwọn àmì ìsàlẹ̀ ká nínú ìtẹ̀léra T2W dínkù.
A le rii hyperplasia egungun ti o han gbangba ni aaye gbigbe ara egungun pada ninu ẹgbẹ NPE, ati hyperplasia egungun waye ni iyara lati ọsẹ 12 si 20 (Fig. 2C) ni akawe pẹlu ẹgbẹ NPE, ko si iyipada pataki ti a ṣe akiyesi ninu awọn ara egungun ti a ṣe apẹẹrẹ; Ẹgbẹ Sham ati ẹgbẹ ME (Fig. 2C) 2A,B).
(A) Ojú ara ẹ̀gbẹ́ ní apá tí a gbìn náà mọ́lẹ̀ gan-an, ihò náà ń wòsàn dáadáa, kò sì sí hyperplasia nínú ara ẹ̀gbẹ́. (B) Àwòrán ibi tí a gbìn sínú ẹgbẹ́ ME jọ ti ẹgbẹ́ iṣẹ́ abẹ àfọwọ́kọ náà, kò sì sí ìyípadà tó hàn gbangba nínú ìrísí ibi tí a gbìn sínú rẹ̀ bí àkókò ti ń lọ. (C) Hyperplasia egungun wáyé ní ibi tí a gbìn sínú ẹgbẹ́ NPE. Hyperplasia egungun pọ̀ sí i kíákíá, ó sì tún tàn kálẹ̀ nípasẹ̀ díìsìkì intervertebral sí ara ẹ̀gbẹ́ ẹ̀gbẹ́.
Àgbéyẹ̀wò ìtàn ara fúnni ní àlàyé tó kún rẹ́rẹ́ nípa ìṣẹ̀dá egungun. Àwòrán 3 fi àwọn fọ́tò àwọn apá lẹ́yìn iṣẹ́ abẹ tí a fi H&E ṣe àwọ̀ sí hàn. Nínú ẹgbẹ́ iṣẹ́ abẹ, àwọn chondrocytes wà ní ìtò dáadáa, a kò sì rí ìdàgbàsókè sẹ́ẹ̀lì kankan (Àwòrán 3A). Ipò tí ó wà nínú ẹgbẹ́ ME jọ ti ẹgbẹ́ iṣẹ́ abẹ (Àwòrán 3B). Ṣùgbọ́n, nínú ẹgbẹ́ NPE, a rí ọ̀pọ̀lọpọ̀ chondrocytes àti ìdàgbàsókè àwọn sẹ́ẹ̀lì bíi NP ní ibi tí a ti gbé e kalẹ̀ (Àwòrán 3C);
(A) A le ri awọn Trabeculae nitosi awo opin, awọn chondrocytes ni a ṣeto daradara pẹlu iwọn ati apẹrẹ sẹẹli ti o jọra ati pe ko si itankale (igba 40). (B) Ipo ti aaye gbigbe sinu ẹgbẹ ME jọ ti ẹgbẹ sham. A le rii awọn Trabeculae ati awọn chondrocytes, ṣugbọn ko si itankalẹ ti o han gbangba ni aaye gbigbe (igba 40). (B) A le rii pe awọn chondrocytes ati awọn sẹẹli ti o dabi NP pọ si ni pataki, ati pe apẹrẹ ati iwọn awọn chondrocytes ko baamu (igba 40).
A ṣe akiyesi ikosile mRNA interleukin 4 (IL-4), mRNA interleukin 17 (IL-17), ati mRNA interferon γ (IFN-γ) ninu awọn ẹgbẹ NPE ati ME mejeeji. Nigbati a ba fi awọn ipele ikosile ti awọn jiini afojusun we, ikosile jiini ti IL-4, IL-17, ati IFN-γ pọ si ni pataki ninu ẹgbẹ NPE ni akawe pẹlu ti ẹgbẹ ME ati ẹgbẹ iṣiṣẹ sham (Fig. 4) (P < 0.05). Ni akawe pẹlu ẹgbẹ iṣiṣẹ sham, awọn ipele ikosile ti IL-4, IL-17, ati IFN-γ ninu ẹgbẹ ME pọ si diẹ ati pe ko de iyipada iṣiro (P > 0.05).
Ìfarahàn mRNA ti IL-4, IL-17 ati IFN-γ ninu ẹgbẹ NPE fihan pe o ga ju awọn ti o wa ninu ẹgbẹ iṣẹ-ṣiṣe sham ati ẹgbẹ ME lọ (P < 0.05).
Ní ìyàtọ̀ sí èyí, àwọn ìpele ìfarahàn nínú ẹgbẹ́ ME kò fi ìyàtọ̀ pàtàkì hàn (P>0.05).
A ṣe àgbéyẹ̀wò Western blot nípa lílo àwọn èròjà tí ó wà ní ọjà láti fìdí ìrísí mRNA tí a yípadà múlẹ̀. Gẹ́gẹ́ bí a ṣe fihàn nínú Àwòrán 5A,B, ní ìfiwéra pẹ̀lú ẹgbẹ́ ME àti ẹgbẹ́ iṣẹ́ sham, ìwọ̀n amuaradagba ti IL-4 àti IL-17 nínú ẹgbẹ́ NPE pọ̀ sí i gidigidi (P < 0.05). Ní ìfiwéra pẹ̀lú ẹgbẹ́ iṣẹ́ sham, ìwọ̀n amuaradagba ti IL-4 àti IL-17 nínú ẹgbẹ́ ME kò dé àwọn àyípadà pàtàkì ní ìṣirò (P> 0.05).
(A) Ìwọ̀n amuaradagba ti IL-4 ati IL-17 ninu ẹgbẹ NPE ga ju awọn ti o wa ninu ẹgbẹ ME ati ẹgbẹ placebo lọ (P < 0.05). (B) Histogram Western blot.
Nítorí iye àwọn àpẹẹrẹ ènìyàn tí a rí nígbà iṣẹ́-abẹ, àwọn ìwádìí tí ó ṣe kedere àti tí ó kún rẹ́rẹ́ lórí àrùn MC ṣòro díẹ̀. A gbìyànjú láti gbé àpẹẹrẹ ẹranko kan kalẹ̀ ti MC láti kẹ́kọ̀ọ́ nípa àwọn ìlànà àrùn tí ó ṣeé ṣe. Ní àkókò kan náà, a lo ìṣàyẹ̀wò radiological, ìṣàyẹ̀wò histological àti ìṣàyẹ̀wò molecular biological láti tẹ̀lé ipa MC tí NP autograft fà. Nítorí náà, àpẹẹrẹ ìfiran NP yọrí sí ìyípadà díẹ̀díẹ̀ nínú agbára àmì láti ọ̀sẹ̀ 12 sí 20-ọsẹ̀ àkókò (àmì ìdapọ̀ kékeré nínú àwọn ìtẹ̀lé T1W àti àmì ìdarí kékeré nínú àwọn ìtẹ̀lé T2W), tí ó ń fi àwọn ìyípadà àsopọ hàn, àti àwọn ìṣàyẹ̀wò histological àti molecular biological jẹ́rìí sí àwọn àbájáde ìwádìí radiological.
Àwọn àbájáde ìwádìí yìí fihàn pé àwọn ìyípadà ojú àti ìtàn ara wáyé níbi tí ìrúfin ara egungun ti wáyé nínú ẹgbẹ́ NPE. Ní àkókò kan náà, a rí ìfarahàn àwọn jínì IL-4, IL-17 àti IFN-γ, àti IL-4, IL-17 àti IFN-γ, èyí tí ó fihàn pé ìrúfin ti àsopọ ara nucleus pulposus nínú ara egungun egungun le fa ọ̀pọ̀lọpọ̀ àwọn ìyípadà àmì àti ìrísí ara. Ó rọrùn láti rí i pé àwọn ànímọ́ àmì ti àwọn ara egungun egungun ti àpẹẹrẹ ẹranko (ìrísí kékeré nínú ìrísí T1W, àmì àpapọ̀ àti àmì kékeré nínú ìrísí T2W) jọra gan-an sí ti àwọn sẹ́ẹ̀lì egungun egungun ènìyàn, àti àwọn ànímọ́ MRI tún fìdí àwọn àkíyèsí ti histology àti anatomy gross múlẹ̀, ìyẹn ni pé, àwọn ìyípadà nínú àwọn sẹ́ẹ̀lì ara egungun egungun ń tẹ̀síwájú. Bó tilẹ̀ jẹ́ pé ìdáhùn ìgbóná tí ìpalára ńlá fà lè farahàn ní kété lẹ́yìn ìrún, àwọn àbájáde MRI fihàn pé àwọn ìyípadà àmì tí ń pọ̀ sí i ń farahàn ní ọ̀sẹ̀ 12 lẹ́yìn ìrún àti pé ó dúró títí di ọ̀sẹ̀ 20 láìsí àmì ìpadàbọ̀sípò tàbí ìyípadà àwọn ìyípadà MRI. Àwọn àbájáde wọ̀nyí fihàn pé autologous vertebral NP jẹ́ ọ̀nà tí ó ṣeé gbẹ́kẹ̀lé fún dídá MV onítẹ̀síwájú sílẹ̀ nínú àwọn ehoro.
Àwòṣe ìgún yìí nílò ọgbọ́n tó péye, àkókò, àti ìsapá iṣẹ́-abẹ. Nínú àwọn ìwádìí àkọ́kọ́, pípa abẹ́rẹ́ tàbí ìfúnni ní agbára púpọ̀ jù ti àwọn ẹ̀yà ara paravertebral ligamentous lè yọrí sí ìṣẹ̀dá osteophytes vertebral. A gbọ́dọ̀ ṣọ́ra kí a má ba àwọn díìsì tó wà ní ẹ̀gbẹ́ jẹ́ tàbí kí a mú wọn bínú. Níwọ́n ìgbà tí a gbọ́dọ̀ ṣàkóso jíjìn ìwọ̀lẹ̀ láti gba àwọn àbájáde tó báramu àti èyí tí a lè tún ṣe, a fi ọwọ́ ṣe plug kan nípa gígé àpò abẹ́rẹ́ gígùn 3 mm. Lílo plug yìí ń rí i dájú pé ìjìnlẹ̀ ìgbẹ́sẹ̀ kan náà wà nínú ara ẹ̀gbẹ́. Nínú àwọn ìwádìí àkọ́kọ́, àwọn oníṣẹ́ abẹ orthopedic mẹ́ta tí wọ́n kópa nínú iṣẹ́-abẹ náà rí i pé abẹ́rẹ́ oníwọ̀n 16 rọrùn láti lò ju abẹ́rẹ́ oníwọ̀n 18 tàbí àwọn ọ̀nà mìíràn lọ. Láti yẹra fún ẹ̀jẹ̀ púpọ̀ nígbà ìgbẹ́sẹ̀, mímú abẹ́rẹ́ náà dúró jẹ́ẹ́ fún ìgbà díẹ̀ yóò pèsè ihò ìfàsímọ́ tó yẹ, èyí tí ó túmọ̀ sí pé a lè ṣàkóso ìwọ̀n MC kan ní ọ̀nà yìí.
Bó tilẹ̀ jẹ́ pé ọ̀pọ̀ ìwádìí ló ti fojú sí MC, a kò mọ púpọ̀ nípa ìdí àti ìṣẹ̀dá MC25,26,27. Gẹ́gẹ́ bí àwọn ìwádìí wa tẹ́lẹ̀, a rí i pé ìdáàbòbò ara ẹni ló kó ipa pàtàkì nínú ìṣẹ̀lẹ̀ àti ìdàgbàsókè MC12. Ìwádìí yìí ṣe àyẹ̀wò ìfihàn iye àwọn sẹ́ẹ̀lì CD4, IL-17, àti IFN-γ, èyí tí ó jẹ́ ọ̀nà ìyàtọ̀ pàtàkì ti àwọn sẹ́ẹ̀lì CD4+ lẹ́yìn ìfúnni antigen. Nínú ìwádìí wa, ní ìfiwéra pẹ̀lú ẹgbẹ́ odi, ẹgbẹ́ NPE ní ìfihàn gíga ti IL-4, IL-17, àti IFN-γ, àti ìpele amuaradagba ti IL-4 àti IL-17 tún ga jù bẹ́ẹ̀ lọ.
Ní ti ìṣègùn, ìfarahàn mRNA IL-17 pọ̀ sí i nínú àwọn sẹ́ẹ̀lì NP láti ọ̀dọ̀ àwọn aláìsàn tí wọ́n ní ìfarahàn disiki28. A tún rí ìpele ìfarahàn IL-4 àti IFN-γ tí ó pọ̀ sí i nínú àpẹẹrẹ ìfarahàn disiki tí kò ní ìfúnpọ̀ ní ìfiwéra pẹ̀lú àwọn ìṣàkóso tí ó ní ìlera29. IL-17 kó ipa pàtàkì nínú ìgbóná ara, ìpalára àsopọ nínú àwọn àrùn autoimmune30 ó sì mú kí ìdáhùn àjẹ́sára sí IFN-γ31 pọ̀ sí i. A ti ròyìn ìpalára àsopọ tí IL-17 ti mú pọ̀ sí i nínú àwọn eku MRL/lpr32 àti àwọn eku tí ó lè farahàn fún autoimmunity33. IL-4 lè dènà ìfarahàn àwọn cytokines proinflammatory (bíi IL-1β àti TNFα) àti ìṣiṣẹ́ macrophage34. A ròyìn pé ìfarahàn mRNA ti IL-4 yàtọ̀ síra nínú ẹgbẹ́ NPE ní ìfiwéra pẹ̀lú IL-17 àti IFN-γ ní àkókò kan náà; Ìfarahàn mRNA ti IFN-γ nínú ẹgbẹ́ NPE ga ju ti àwọn ẹgbẹ́ mìíràn lọ. Nítorí náà, ìṣẹ̀dá IFN-γ lè jẹ́ alárinà ìdáhùn ìgbóná ara tí ìfàsẹ́yìn NP fà. Àwọn ìwádìí ti fihàn pé ọ̀pọ̀lọpọ̀ irú sẹ́ẹ̀lì ni a ń ṣe IFN-γ, títí bí àwọn sẹ́ẹ̀lì T olùrànlọ́wọ́ tí a ti mú ṣiṣẹ́, àwọn sẹ́ẹ̀lì apanilára àdánidá, àti àwọn macrophages35,36, ó sì jẹ́ cytokine pàtàkì tí ó ń mú kí àwọn ìdáhùn ààbò ara ṣiṣẹ́37.
Ìwádìí yìí fihàn pé ìdáhùn ara-ẹni lè ní ipa nínú ìṣẹ̀lẹ̀ àti ìdàgbàsókè MC. Luoma àti àwọn ẹlòmíràn rí i pé àwọn ànímọ́ àmì ti MC àti NP tó gbajúmọ̀ jọra lórí MRI, àwọn méjèèjì sì fi àmì gíga hàn nínú ìpele T2W38. A ti fìdí rẹ̀ múlẹ̀ pé àwọn cytokine kan ní ìbáṣepọ̀ pẹ̀lú ìṣẹ̀lẹ̀ MC, bíi IL-139. Ma àti àwọn ẹlòmíràn dámọ̀ràn pé ìtẹ̀síwájú sókè tàbí sísàlẹ̀ ti NP lè ní ipa ńlá lórí ìṣẹ̀lẹ̀ àti ìdàgbàsókè ti MC12. Bobechko40 àti Herzbein àti àwọn ẹlòmíràn ròyìn pé NP jẹ́ àsopọ ara tí kò le wọ inú ìṣàn ẹ̀jẹ̀ láti ìgbà ìbí. Àwọn ìtẹ̀síwájú NP máa ń mú àwọn ara àjèjì wọ inú ìpèsè ẹ̀jẹ̀, nípa bẹ́ẹ̀ wọ́n máa ń ṣe àtúnṣe sí àwọn ìṣe autoimmune agbègbè42. Àwọn ìṣe autoimmune lè fa ọ̀pọ̀lọpọ̀ àwọn ohun tí ó ń fa àjẹsára, àti nígbà tí àwọn nǹkan wọ̀nyí bá ń fara hàn sí àwọn àsọ, wọ́n lè fa àwọn ìyípadà nínú ìfàmìsí43. Nínú ìwádìí yìí, ìfarahàn IL-4, IL-17 àti IFN-γ jẹ́ àwọn ohun tí ó sábà máa ń fa àjẹsára, èyí tí ó tún fi hàn pé ìbáṣepọ̀ tó súnmọ́ NP àti MCs44 ló wà láàárín wọn. Àpẹẹrẹ ẹranko yìí fara wé ìtẹ̀síwájú NP àti wíwọlé sínú àwo ìparí. Ìlànà yìí tún fi ipa tí ìdáàbòbò ara-ẹni ní lórí MC hàn.
Gẹ́gẹ́ bí a ti retí, àwòrán ẹranko yìí fún wa ní ìpele tó ṣeé ṣe láti kẹ́kọ̀ọ́ nípa MC. Síbẹ̀síbẹ̀, àwòrán yìí ṣì ní àwọn ààlà díẹ̀: àkọ́kọ́, nígbà ìpele ìwòye ẹranko, àwọn ehoro kan ní ìpele àárín gbọ́dọ̀ di aláìlera fún ìdánwò histological àti molecular biology, nítorí náà àwọn ẹranko kan “já sí lílò” lórí àkókò. Èkejì, bó tilẹ̀ jẹ́ pé a ti ṣètò àwọn àkókò mẹ́ta nínú ìwádìí yìí, ó ṣeni láàánú pé a ṣe àpẹẹrẹ irú MC kan ṣoṣo (Modic type I yípadà), nítorí náà kò tó láti ṣojú fún ìlànà ìdàgbàsókè àrùn ènìyàn, àti pé a nílò láti ṣètò àwọn àkókò púpọ̀ sí i láti kíyèsí gbogbo àwọn ìyípadà àmì náà dáadáa. Ẹ̀kẹta, àwọn ìyípadà nínú ìṣètò àsopọ lè hàn kedere nípa lílo histological coloring, ṣùgbọ́n àwọn ọ̀nà ìwádìí pàtàkì kan lè fi àwọn ìyípadà microstructural hàn nínú àwòrán yìí dáadáa. Fún àpẹẹrẹ, a lo polarized light microscopy láti ṣe àgbéyẹ̀wò ìṣẹ̀dá fibrocartilage nínú àwọn disiki intervertebral ehoro45. Àwọn ipa ìgbà pípẹ́ ti NP lórí MC àti endplate nílò ìwádìí síwájú sí i.
A pín àwọn ehoro funfun akọ mẹ́rìnléláàádọ́ta (tó wúwo tó nǹkan bí 2.5-3 kg, tó wà láàárín oṣù mẹ́ta sí mẹ́ta àti ààbọ̀) sí ẹgbẹ́ iṣẹ́ abẹ, ẹgbẹ́ ìtọ́jú iṣan (ẹgbẹ́ ME) àti ẹgbẹ́ ìtọ́jú gbòǹgbò iṣan (ẹgbẹ́ NPE). Gbogbo ìlànà ìwádìí ni Ìgbìmọ̀ Ìwà Rere ti Ilé Ìwòsàn Tianjin fọwọ́ sí, a sì ṣe àwọn ọ̀nà ìwádìí náà ní ìbámu pẹ̀lú àwọn ìlànà tí a fọwọ́ sí.
A ti ṣe àtúnṣe sí ọ̀nà iṣẹ́ abẹ ti S. Sobajima 46. A gbé ehoro kọ̀ọ̀kan sí ipò ìdúró ní ẹ̀gbẹ́, a sì fi ojú iwájú àwọn disiki intervertebral lumbar márùn-ún tí ó tẹ̀lé ara wọn hàn nípa lílo ọ̀nà ìtọ́jú ẹ̀yìn ẹ̀yìn. A fún ehoro kọ̀ọ̀kan ní anesthesia gbogbogbò (20% urethane, 5 ml/kg nípasẹ̀ iṣan etí). A gé awọ ara gígùn láti etí ìsàlẹ̀ egungun sí etí egungun, 2 cm ventral sí àwọn iṣan paravertebral. A fi egungun ẹ̀yìn anterolateral ọ̀tún láti L1 sí L6 hàn nípa gígé àsopọ abẹ tí ó wà lórí, àsopọ retroperitoneal, àti àwọn iṣan (Àwòrán 6A). A pinnu ìpele disiki náà nípa lílo etí egungun gẹ́gẹ́ bí àmì anatomical fún ìpele disiki L5-L6. Lo abẹ́rẹ́ ìfàgùn 16-gauge láti lu ihò kan nítòsí àwo ìparí ti vertebra L5 sí ìjìnlẹ̀ 3 mm (Àwòrán 6B). Lo abẹ́rẹ́ 5-ml láti fi abẹ́rẹ́ nucleus autologous pulposus sínú díìsì intervertebral L1-L2 (Àwòrán 6C). Yọ nucleus pulposus tàbí iṣan kúrò gẹ́gẹ́ bí àwọn ènìyàn kọ̀ọ̀kan ṣe béèrè. Lẹ́yìn tí a bá ti gbẹ́ ihò náà, a ó gbé àwọn ìsopọ̀ tí ó lè gbà sínú fascia jíjìn, fascia àti awọ ara, kí a má ba à ba àsopọ periosteal ti ara egungun jẹ́ nígbà iṣẹ́-abẹ.
(A) A fi àwokòtò ìsàlẹ̀ ẹ̀yìn mẹ́rìndínlógún hàn díìsì L5–L6. (B) Lo abẹ́rẹ́ oníwọ̀n mẹ́rìndínlógún láti gbẹ́ ihò kan nítòsí àwo ìsàlẹ̀ L5. (C) A kó àwọn MF aláfọwọ́ṣe.
A fi 20% urethane (5 ml/kg) tí a fún ni a fi ń lo oògùn akuniloorun gbogbogbòò, a sì tún fi rédíò ẹ̀yìn ẹ̀yìn ṣe é ní ọ̀sẹ̀ 12, 16, àti 20 lẹ́yìn iṣẹ́ abẹ.
A fi abẹ́rẹ́ ketamine (25.0 mg/kg) àti sodium pentobarbital nínú ẹ̀jẹ̀ (1.2 g/kg) rúbọ àwọn ehoro ní ọ̀sẹ̀ 12, 16 àti 20 lẹ́yìn iṣẹ́ abẹ. A yọ gbogbo ẹ̀yìn náà kúrò fún ìwádìí histological àti ìwádìí gidi. A lo Quantitative reverse transcription (RT-qPCR) àti Western blotting láti ṣàwárí àwọn ìyípadà nínú àwọn ohun tí ó ń fa àjẹ́sí.
A ṣe àwọn àyẹ̀wò MRI nínú ehoro nípa lílo 3.0 T clinical magnet (GE Medical Systems, Florence, SC) tí a fi ohun èlò ìtọ́jú ara tí ó ní orthogonal limb coil receiver ṣe. A fi 20% urethane (5 mL/kg) pa ehoro ní ẹnu nípasẹ̀ iṣan etí, lẹ́yìn náà a gbé ehoro sí iwájú inú mágnẹ́ẹ̀tì pẹ̀lú agbègbè lumbar tí ó wà lórí ìpele ìyípo 5-inch (GE Medical Systems). A gba àwọn àwòrán localizer Coronal T2-weighted (TR, 1445 ms; TE, 37 ms) láti ṣàlàyé ibi tí díìsìkì lumbar wà láti L3–L4 sí L5–L6. A gba àwọn ìgé T2-weighted plane sagittal pẹ̀lú àwọn ètò wọ̀nyí: ìtẹ̀léra spin-echo kíákíá pẹ̀lú àkókò àtúnṣe (TR) ti 2200 ms àti àkókò echo (TE) ti 70 ms, matrix; pápá ìwòran ti 260 àti ìṣírí mẹ́jọ; Ìwọ̀n gígé náà jẹ́ 2 mm, àlàfo náà jẹ́ 0.2 mm.
Lẹ́yìn tí wọ́n ya fọ́tò ìkẹyìn tí wọ́n sì pa ehoro tó kẹ́yìn, wọ́n yọ àwọn sẹ́ẹ̀lì àfọwọ́kọ, àwọn tí wọ́n fi iṣan ara ṣe, àti àwọn sẹ́ẹ̀lì NP kúrò fún àyẹ̀wò histological. Wọ́n so àwọn sẹ́ẹ̀lì náà mọ́ nínú formalin tí a fi 10% boffered buffered fún ọ̀sẹ̀ kan, wọ́n sì fi ethylenediaminetetraacetic acid tú kalsiọmu kúrò, wọ́n sì pín paraffin sí wẹ́wẹ́. Wọ́n fi àwọn búlọ́ọ̀kù àfọwọ́kọ náà sínú paraffin, wọ́n sì gé wọn sí àwọn sẹ́ẹ̀lì sagittal (nípọn 5 μm) nípa lílo microtome. Wọ́n fi hematoxylin àti eosin (H&E) kun àwọn sẹ́ẹ̀lì náà.
Lẹ́yìn tí wọ́n ti kó àwọn díìsì intervertebral láti inú àwọn ehoro ní ẹgbẹ́ kọ̀ọ̀kan, wọ́n lo ẹ̀ka UNIQ-10 (Shanghai Sangon Biotechnology Co., Ltd., China) láti yọ gbogbo RNA jáde gẹ́gẹ́ bí ìlànà olùpèsè àti ètò ìyípadà ImProm II (Promega Inc., Madison, WI, USA). Wọ́n ṣe ìyípadà.
A ṣe RT-qPCR nípa lílo Prism 7300 (Applied Biosystems Inc., USA) àti SYBR Green Jump Start Taq ReadyMix (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) gẹ́gẹ́ bí ìlànà olùpèsè. Ìwọ̀n ìṣesí PCR jẹ́ 20 μl ó sì ní 1.5 μl ti cDNA tí a ti pòpọ̀ àti 0.2 μM ti primer kọ̀ọ̀kan. OligoPerfect Designer (Invitrogen, Valencia, CA) ló ṣe àwọn primers, Nanjing Golden Stewart Biotechnology Co., Ltd. (China) sì ṣe é (Táblì 1). Àwọn ipò yíyípo ooru wọ̀nyí ni a lò: ìgbésẹ̀ ìṣiṣẹ́ polymerase àkọ́kọ́ ní 94°C fún ìṣẹ́jú 2, lẹ́yìn náà àwọn ìṣẹ́jú 40 ti 15 s kọ̀ọ̀kan ní 94°C fún denaturation template, annealing fún ìṣẹ́jú 1 ní 60°C, extension, àti fluorescence. A ṣe àwọn ìwọ̀n fún ìṣẹ́jú 1 ní 72°C. A ṣe àgbékalẹ̀ gbogbo àwọn àpẹẹrẹ náà ní ìgbà mẹ́ta, a sì lo iye àròpín fún ìwádìí RT-qPCR. A ṣe àgbékalẹ̀ àwọn ìwádìí amplification nípa lílo FlexStation 3 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA). A ṣe àgbékalẹ̀ ìfihàn jínì IL-4, IL-17, àti IFN-γ sí ìṣàkóso endogenous (ACTB). A ṣe ìṣirò àwọn ìpele ìfihàn ìbátan ti mRNA afojusun nípa lílo ọ̀nà 2-ΔΔCT.
A yọ gbogbo amuaradagba lati inu awọn àsopọ nipa lilo ohun elo homogenizer tissue ninu RIPA lysis buffer (ti o ni protease ati phosphatase inhibitor cocktail) lẹhinna a fi centrifuge sinu 13,000 rpm fun iṣẹju 20 ni 4°C lati yọ awọn idoti àsopọ kuro. A gbe 50 micrograms ti amuaradagba sinu laini kọọkan, a ya wọn sọtọ nipasẹ 10% SDS-PAGE, lẹhinna a gbe wọn lọ si awo PVDF kan. A ṣe idena ninu wara gbigbẹ ti ko ni ọra 5% ninu saline Tris-buffered (TBS) ti o ni 0.1% Tween 20 fun wakati 1 ni iwọn otutu yara. A fi awo naa sinu awo antibody anti-decorin primary (ti a ti fomi po 1:200; Boster, Wuhan, China) (ti a ti fomi po 1:200; Bioss, Beijing, China) ni alẹ kan ni 4°C o si ṣe atunṣe ni awọn ọjọ keji; pẹ̀lú antibody kejì (ewúrẹ́ anti-rabbit immunoglobulin G ní ìdajì 1:40,000) tí a so pọ̀ mọ́ horseradish peroxidase (Boster, Wuhan, China) fún wákàtí kan ní iwọ̀n otútù yàrá. A rí àwọn àmì Western blot nípa lílo chemiluminescence tí ó pọ̀ sí i lórí awọ chemiluminescent lẹ́yìn ìtànṣán X-ray. Fún ìwádìí densitometric, a ṣe àyẹ̀wò àwọn blots àti ṣíṣirò wọn nípa lílo sọfítwọ́ọ̀dù BandScan àti àwọn èsì náà ni a sọ gẹ́gẹ́ bí ìpíndọ́gba ti ìdènà ...
A ṣe àwọn ìṣirò ìṣirò nípa lílo àpò ìṣiṣẹ́ SPSS16.0 (SPSS, USA). A ṣe àfihàn àwọn dátà tí a kó jọ nígbà ìwádìí náà gẹ́gẹ́ bí ìwọ̀n ìyípadà ± ìwọ̀n (apapọ̀ ± SD) a sì ṣe àyẹ̀wò wọn nípa lílo ìṣàyẹ̀wò ìyàtọ̀ ọ̀nà kan-ọ̀kan (ANOVA) láti mọ ìyàtọ̀ láàrín àwọn ẹgbẹ́ méjèèjì. A kà P < 0.05 sí pàtàkì nínú ìṣirò.
Nítorí náà, ìdásílẹ̀ àpẹẹrẹ ẹranko ti MC nípa gbígbé àwọn NPs ara-ẹni sínú ara ẹ̀gbẹ́ àti ṣíṣe àkíyèsí macroanatomical, ìwádìí MRI, ìṣàyẹ̀wò histological àti ìṣàyẹ̀wò molecular biological le di ohun èlò pàtàkì fún ṣíṣàyẹ̀wò àti òye àwọn ìlànà ti MC ènìyàn àti ṣíṣe àgbékalẹ̀ àwọn ìtọ́jú ìlera tuntun.
Bí a ṣe lè tọ́ka sí àpilẹ̀kọ yìí: Han, C. àti àwọn ẹlòmíràn. A ṣe àgbékalẹ̀ àpẹẹrẹ ẹranko ti àwọn àyípadà Modic nípa fífi autologous nucleus pulposus sínú egungun subchondral ti spine lumbar. Sci. Rep. 6, 35102: 10.1038/srep35102 (2016).
Weishaupt, D., Zanetti, M., Hodler, J., àti Boos, N. Àwòrán ìfàmọ́ra okùn ẹ̀yìn lumbar: ìbísí ìfàmọ́ra àti ìdúró disiki, ìfúnpọ̀ gbòǹgbò ara, àwọn ìṣòro àtẹ̀gùn, àti àrùn osteoarthritis oríkèé ara ní àwọn olùyọ̀ǹda aláìlágbára. ìwọ̀n. Radiology 209, 661–666, doi:10.1148/radiology.209.3.9844656 (1998).
Kjaer, P., Korsholm, L., Bendix, T., Sorensen, JS, àti Leboeuf-Eed, K. Àwọn ìyípadà Modic àti ìbáṣepọ̀ wọn pẹ̀lú àwọn àwárí ìṣègùn. Ìwé Ìròyìn Ẹ̀yìn Àìsàn European: ìtẹ̀jáde tí ó jẹ́ ti European Spine Society, European Society of Spinal Deformity, àti European Society for Cervical Spine Research 15, 1312–1319, doi: 10.1007/s00586-006-0185-x (2006).
Kuisma, M., àti àwọn ẹlòmíràn. Àwọn ìyípadà Modic nínú àwọn àwo ẹ̀yìn vertebrae lumbar: ìbísí àti ìbáṣepọ̀ pẹ̀lú ìrora ẹ̀yìn kékeré àti sciatica nínú àwọn òṣìṣẹ́ ọkùnrin tí wọ́n jẹ́ àgbàlagbà. Ẹ̀yìn 32, 1116–1122, doi:10.1097/01.brs.0000261561.12944.ff (2007).
de Roos, A., Kressel, H., Spritzer, K., àti Dalinka, M. MRI ti àwọn ìyípadà ọrá inú egungun nítòsí àwo ìparí nínú àrùn ìbàjẹ́ ti ẹ̀yìn ẹ̀yìn. AJR. Ìwé ìròyìn Amẹ́ríkà ti Radiology 149, 531–534, doi: 10.2214/ajr.149.3.531 (1987).
Modic, MT, Steinberg, PM, Ross, JS, Masaryk, TJ, àti Carter, JR Àrùn dígí tí ó ń bàjẹ́: ìṣàyẹ̀wò àwọn ìyípadà ọrá inú egungun pẹ̀lú MRI. Radiology 166, 193–199, doi:10.1148/radiology.166.1.3336678 (1988).
Modic, MT, Masaryk, TJ, Ross, JS, àti Carter, JR Àwòrán àrùn disiki tó ń bàjẹ́. Ìwádìí 168, 177–186, doi: 10.1148/ìwádìí radiology.168.1.3289089 (1988).
Jensen, TS, àti àwọn ẹlòmíràn. Àwọn àsọtẹ́lẹ̀ nípa àwọn ìyípadà àmì ìsàlẹ̀ neovertebral (Modic) nínú gbogbo ènìyàn. Ìwé Ìròyìn Ẹ̀yìn European: Ìtẹ̀jáde Olórí ti European Spine Society, European Society of Spinal Deformity, àti European Society for Cervical Spine Research, Division 19, 129–135, doi: 10.1007/s00586-009-1184-5 (2010).
Albert, HB àti Mannisch, K. Modic yí padà lẹ́yìn ìfàsẹ́yìn disiki lumbar. Ìwé Ìròyìn Ẹ̀yìn Àrùn European: Ìtẹ̀jáde Olórí ti Ẹgbẹ́ Ẹ̀yìn Àrùn European, Ẹgbẹ́ Àrùn Ẹ̀yìn Àrùn European àti Ẹgbẹ́ European fún Ìwádìí Ẹ̀yìn Àrùn Cervical 16, 977–982, doi: 10.1007/s00586-007-0336-8 (2007).
Kerttula, L., Luoma, K., Vehmas, T., Gronblad, M., àti Kaapa, E. Àwọn ìyípadà irú Modic I lè sọ àsọtẹ́lẹ̀ ìbàjẹ́ dídíìsì ìyípadà kíákíá: ìwádìí ọdún kan tí a lè ṣe. Ìwé ìròyìn European Spine Journal 21, 1135–1142, doi: 10.1007/s00586-012-2147-9 (2012).
Hu, ZJ, Zhao, FD, Fang, XQ àti Fan, SW Àwọn àyípadà Modic: àwọn okùnfà tó ṣeéṣe àti àfikún sí ìbàjẹ́ disiki lumbar. Àwọn Àbá Ìṣègùn 73, 930–932, doi: 10.1016/j.mehy.2009.06.038 (2009).
Krok, HV Ìfọ́ disiki inú. Àwọn ìṣòro ìfàsẹ́yìn disiki lórí ọdún 50. Ẹ̀yìn ẹ̀yìn (Phila Pa 1976) 11, 650–653 (1986).
Àkókò ìfìwéránṣẹ́: Oṣù Kejìlá-13-2024