Ipa anti-biofilm ati iwuri ti iwosan ti awọn aṣọ nitrate fadaka

Ẹ ṣeun fún ṣíbẹ̀wò sí Nature.com. Ẹ̀yà ẹ̀rọ aṣàwárí tí ẹ ń lò ní àtìlẹ́yìn CSS díẹ̀. Fún àwọn àbájáde tó dára jùlọ, a gbà yín nímọ̀ràn pé kí ẹ lo ẹ̀yà tuntun ti ẹ̀rọ aṣàwárí yín (tàbí kí ẹ má ṣe pa Ìbáramu Ipò nínú Internet Explorer mọ́). Ní ​​báyìí ná, láti rí i dájú pé àtìlẹ́yìn ń lọ lọ́wọ́, a ń fi ojú òpó náà hàn láìsí ìrísí tàbí JavaScript.
Ìdàgbàsókè àwọn kòkòrò inú ọgbẹ́ sábà máa ń fara hàn gẹ́gẹ́ bí biofilms, èyí tí ó ń dí ìwòsàn lọ́wọ́ tí ó sì ṣòro láti parẹ́. Àwọn ohun èlò ìtọ́jú fàdákà tuntun sọ pé ó ń gbógun ti àkóràn ọgbẹ́, ṣùgbọ́n agbára wọn láti dènà àrùn àti àwọn ipa ìwòsàn tí kò dá lórí àkóràn kò sí ní gbogbogbòò. Nípa lílo àwọn àpẹẹrẹ biofilm Staphylococcus aureus àti Pseudomonas aeruginosa nínú vitro àti nínú vivo, a ròyìn bí àwọn ohun èlò ìtọ́jú ion Ag1+ ṣe ń ṣiṣẹ́; àwọn ohun èlò ìtọ́jú Ag1+ tí ó ní ethylenediaminetetraacetic acid àti benzetonium chloride (Ag1+/EDTA/BC), àti àwọn ohun èlò ìtọ́jú tí ó ní silver nitrate (Ag oxysalts). , tí ó ń ṣe àwọn ions Ag1+, Ag2+ àti Ag3+ láti gbógun ti biofilm ọgbẹ́ àti ipa rẹ̀ lórí ìwòsàn. Àwọn ohun èlò ìtọ́jú Ag1+ ní ipa díẹ̀ lórí biofilm ọgbẹ́ nínú vitro àti nínú àwọn eku (C57BL/6j). Ní ìyàtọ̀ sí èyí, iyọ̀ Ag tí a fi oxygen ṣe àti àwọn aṣọ Ag1+/EDTA/BC dín iye àwọn bakitéríà tí ó ṣeé ṣe kù nínú biofilms in vitro, wọ́n sì fi hàn pé wọ́n dín iye àwọn èròjà bakitéríà àti EPS kù nínú biofilms ọgbẹ́ eku. Àwọn aṣọ ìbora wọ̀nyí ní ipa ọ̀tọ̀ọ̀tọ̀ lórí ìwòsàn àwọn ọgbẹ́ tí biofilm ti ní àkóràn àti àwọn tí kò ní àkóràn biofilm, pẹ̀lú àwọn aṣọ ìbora iyọ̀ tí a fi oxygen ṣe ní àwọn ipa tí ó dára jù lórí reepithelialization, ìwọ̀n ọgbẹ́, àti ìgbóná ní ìfiwéra pẹ̀lú àwọn ìtọ́jú ìṣàkóso àti àwọn aṣọ ìbora silver mìíràn. Àwọn ànímọ́ physicochemical ti àwọn aṣọ ìbora silver le ní àwọn ipa ọ̀tọ̀ọ̀tọ̀ lórí biofilm ọgbẹ́ àti ìwòsàn, èyí sì yẹ kí a gbé yẹ̀wò nígbà tí a bá ń yan aṣọ ìbora fún ìtọ́jú àwọn ọgbẹ́ tí biofilm ti ní àkóràn.
Àwọn ọgbẹ́ onígbà pípẹ́ ni a túmọ̀ sí “àwọn ọgbẹ́ tí kò lè tẹ̀síwájú nípasẹ̀ àwọn ìpele ìwòsàn déédéé ní ọ̀nà tí ó wà ní ìtòlẹ́sẹẹsẹ àti ní àkókò” 1. Àwọn ọgbẹ́ onígbà pípẹ́ ń fa ẹrù ọpọlọ, àwùjọ àti ọrọ̀ ajé fún àwọn aláìsàn àti ètò ìtọ́jú ìlera. A ṣírò owó tí NHS ná lọ́dọọdún lórí ìtọ́jú àwọn ọgbẹ́ àti àwọn àrùn tí ó so mọ́ ọn sí £8.3 bilionu ní 2017–182. Àwọn ọgbẹ́ onígbà pípẹ́ tún jẹ́ ìṣòro tí ó ń ṣòro lọ́wọ́lọ́wọ́ ní Amẹ́ríkà, pẹ̀lú Medicare ṣe ìṣirò iye owó ọdọọdún fún ìtọ́jú àwọn aláìsàn tí wọ́n ní ọgbẹ́ sí $28.1–$96.8 bilionu3.
Àkóràn jẹ́ ohun pàtàkì tó ń dí ọgbẹ́ lọ́wọ́ láti wo ọgbẹ́ sàn. Àkóràn sábà máa ń fara hàn gẹ́gẹ́ bí biofilms, èyí tó wà nínú 78% àwọn ọgbẹ́ onígbà pípẹ́ tí kò ní wo àrùn sàn. Biofilms máa ń ṣẹ̀dá nígbà tí àwọn ohun abẹ̀mí bá so mọ́ àwọn ojú ilẹ̀, bíi ojú ọgbẹ́, tí wọ́n sì lè para pọ̀ láti ṣẹ̀dá àwọn agbègbè tí ń ṣe polymer extracellular (EPS). Biofilm ọgbẹ́ ní í ṣe pẹ̀lú ìdàgbàsókè ìgbóná ara tó ń yọrí sí ìbàjẹ́ àsopọ, èyí tó lè dá ìtọ́jú dúró tàbí kí ó dènà ìwòsàn. Ìbísí nínú ìbàjẹ́ àsopọ lè jẹ́ nítorí ìṣiṣẹ́ matrix metalloproteinases, collagenase, elastase àti reactive oxygen species5. Jù bẹ́ẹ̀ lọ, àwọn sẹ́ẹ̀lì iredodo àti biofilms fúnra wọn jẹ́ àwọn tó ń lo oxygen púpọ̀, nítorí náà wọ́n lè fa hypoxia àsopọ àdúgbò, tí ó ń dín àwọn sẹ́ẹ̀lì oxygen pàtàkì tí a nílò fún àtúnṣe àsopọ tó munadoko kù6.
Àwọn biofilm tó ti dàgbà máa ń kojú àwọn ohun tó ń pa kòkòrò àrùn, wọ́n sì máa ń nílò àwọn ọgbọ́n láti ṣàkóso àkóràn biofilm, bíi ìtọ́jú ẹ̀rọ, lẹ́yìn náà ni ìtọ́jú antimicrobial tó gbéṣẹ́. Nítorí pé biofilm lè mú ara padà bọ̀ sípò kíákíá, àwọn antimicrobial tó gbéṣẹ́ lè dín ewu àtúnṣe kù lẹ́yìn iṣẹ́ abẹ.
Wọ́n ń lo Fadaka sí i nínú àwọn ohun èlò ìpara-aláìsàn, wọ́n sì sábà máa ń lò ó gẹ́gẹ́ bí ìtọ́jú àkọ́kọ́ fún àwọn ọgbẹ́ onígbà pípẹ́ tí ó ní àkóràn. Ọ̀pọ̀lọpọ̀ àwọn ohun èlò ìpara-aláìsàn tí ó wà ní ọjà ló wà, ọ̀kọ̀ọ̀kan wọn ní àkójọpọ̀ fàdakà, ìṣọ̀kan, àti ìpìlẹ̀ matrix. Ìlọsíwájú nínú àwọn ohun èlò ìpara-aláìsàn fàdakà ti yọrí sí ìdàgbàsókè àwọn ohun èlò ìpara-aláìsàn fàdakà tuntun. Fíìmù fàdakà onírin (Ag0) kò ṣiṣẹ́; Láti ṣe àṣeyọrí ìṣiṣẹ́ ìpara-aláìsàn, ó gbọ́dọ̀ pàdánù elekitironi kan láti ṣẹ̀dá fàdakà ionic (Ag1+). Àwọn ohun èlò ìpara-aláìsàn fàdakà ìbílẹ̀ ní àwọn ohun èlò fàdakà tàbí fàdakà onírin tí, nígbà tí a bá fi sí omi, yóò bàjẹ́ láti ṣẹ̀dá àwọn ions Ag1+. Àwọn ions Ag1+ wọ̀nyí ń ṣiṣẹ́ pẹ̀lú sẹ́ẹ̀lì bakitéríà, wọ́n ń yọ àwọn elekitironi kúrò nínú àwọn ohun èlò ìṣètò tàbí àwọn ìlànà pàtàkì tí ó ṣe pàtàkì fún ìwàláàyè. Ìmọ̀-ẹ̀rọ tí a fún ní àṣẹ-àṣẹ ti yọrí sí ìdàgbàsókè ohun èlò fàdakà tuntun kan, Ag oxysalts (fadaka nitrate, Ag7NO11), èyí tí ó wà nínú àwọn ohun èlò ìpara-aláìsàn. Láìdàbí fàdakà ìbílẹ̀, ìbàjẹ́ àwọn iyọ̀ tí ó ní atẹ́gùn ń mú àwọn ipò fàdakà tí ó ní valence gíga (Ag1+, Ag2+ àti Ag3+) jáde. Àwọn ìwádìí nínú vitro ti fihàn pé ìwọ̀nba iyọ̀ fàdákà tí ó ní atẹ́gùn díẹ̀ ló múná dóko ju fàdákà ion kan ṣoṣo (Ag1+) lọ sí àwọn bakitéríà oní àrùn bíi Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus àti Escherichia coli8,9. Irú àṣọ fàdákà tuntun mìíràn ní àwọn èròjà afikún, èyí ni ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) àti benzetonium chloride (BC), èyí tí a ròyìn pé ó dojúkọ biofilm EPS, èyí sì mú kí fàdákà wọ inú biofilm náà. Àwọn ìmọ̀ ẹ̀rọ fàdákà tuntun wọ̀nyí ń fúnni ní àwọn ọ̀nà tuntun láti fojúsùn biofilm ojú ọgbẹ́. Síbẹ̀síbẹ̀, ipa àwọn antimicrobial wọ̀nyí lórí àyíká ọgbẹ́ àti ìwòsàn tí kò ní àkóràn ṣe pàtàkì láti rí i dájú pé wọn kò ṣẹ̀dá àyíká ọgbẹ́ tí kò dára tàbí kí wọ́n dá ìwòsàn dúró. Àwọn àníyàn nípa in vitro fàdákà cytotoxicity ni a ti ròyìn pẹ̀lú ọ̀pọ̀lọpọ̀ àwọn àṣọ fàdákà 10,11. Síbẹ̀síbẹ̀, in vitro cytotoxicity kò tí ì túmọ̀ sí in vivo majele, àti ọ̀pọ̀lọpọ̀ àwọn àṣọ Ag1+ ti fi àmì ààbò tó dára hàn12.
Níbí, a ṣe ìwádìí lórí bí àwọn aṣọ ìbora carboxymethylcellulose tí ó ní àwọn àkójọpọ̀ fàdákà tuntun sí biofilm ojú ọgbẹ́ ní vitro àti in vivo ṣe gbéṣẹ́ tó. Ní àfikún, a ṣe àyẹ̀wò ipa àwọn aṣọ ìbora wọ̀nyí lórí àwọn ìdáhùn sí ààbò ara àti ìwòsàn láìsí àkóràn.
Gbogbo àwọn aṣọ ìbora tí a lò ni a rí gbà ní ọjà. 3M Kerracel Gel Fiber Dressing (3M, Knutsford, UK) jẹ́ aṣọ ìbora okùn jeli tí kìí ṣe antimicrobial 100% carboxymethylcellulose (CMC) tí a lò gẹ́gẹ́ bí aṣọ ìbora ìdarí nínú ìwádìí yìí. A ṣe àyẹ̀wò àwọn aṣọ ìbora okùn CMC mẹ́ta tí ó jẹ́ antimicrobial, èyí ni 3M Kerracel Ag dressing (3M, Knutsford, UK), èyí tí ó ní 1.7 wt%. Iyọ̀ okùn tí a fi oxygen ṣe (Ag7NO11) nínú àwọn ions fadaka tí ó ga jùlọ (Ag1+, Ag2+ àti Ag3+). Nígbà tí Ag7NO11 bá ń bàjẹ́, àwọn ions Ag1+, Ag2+ àti Ag3+ ni a ṣẹ̀dá ní ìpíndọ́gba 1:2:4. Aquacel Ag Afikun ti o ni 1.2% fadaka chloride (Ag1+) (ConvaTec, Deeside, UK) 13 ati Aquacel Ag + Afikun ti o ni 1.2% fadaka chloride (Ag1+), EDTA ati benzetonium chloride (ConvaTec, Deeside, UK) 14.
Àwọn oríṣi tí a lò nínú ìwádìí yìí ni Pseudomonas aeruginosa NCTC 10781 (Public Health England, Salisbury) àti Staphylococcus aureus NCTC 6571 (Public Health England, Salisbury).
A gbin kokoro arun ninu omi ọbẹ̀ Muller-Hinton (Oxoid, Altrincham, UK) ni alẹ. Lẹ́yìn náà, a fi omi pò obẹ̀ Mueller-Hinton ní ìwọ̀n 1:100, a sì fi 200 µl sí orí àwọn awo Whatman cyclopore tí ó ní 0.2 µm (Whatman plc, Maidstone, UK) lórí àwọn àwo agar Mueller-Hinton (Sigma-Aldrich Company Ltd, Kent, Great Britain). Ìṣẹ̀dá biofilm colonial ní 37°C fún wákàtí 24. A dán àwọn biofilm colonial wọ̀nyí wò fún ìfàsẹ́yìn logarithmic.
Gé aṣọ ìbora náà sí àwọn ègé onígun mẹ́rin 3 cm2 kí o sì fi omi tí a ti yọ kúrò nínú rẹ̀ tẹ́lẹ̀. Fi aṣọ ìbora náà sí orí biofilm ti ilé ìtọ́jú náà lórí àwo agar náà. Gbogbo haa 24 ti biofilm ni a yọ kúrò, a sì ṣe ìwọ̀n àwọn bakitéríà tí ó ṣeé ṣe nínú biofilm náà (CFU/ml) nípa lílo ìfọ́pọ̀ onípele (10−1 sí 10−7) nínú omi ọbẹ̀ Day-Angle neutralization (Merck-Millipore). Lẹ́yìn wákàtí 24 ti ìfọ́pọ̀ ní 37°C, a ṣe iye àwọn àwo tí a fi ṣe déédéé lórí àwọn àwo agar Mueller-Hinton. A ṣe ìtọ́jú àti àkókò kọ̀ọ̀kan ní ìlọ́po mẹ́ta, a sì tún ṣe iye àwọn àwo náà fún ìfọ́pọ̀ kọ̀ọ̀kan.
A máa ń gba awọ ara ẹlẹ́dẹ̀ láti ọ̀dọ̀ àwọn obìnrin ẹlẹ́dẹ̀ funfun tó tóbi láàrín ìṣẹ́jú mẹ́ẹ̀ẹ́dógún lẹ́yìn pípa wọ́n ní ìbámu pẹ̀lú àwọn ìlànà ìtajà ọjà ti European Union. A fá awọ ara náà, a sì fi àwọn ohun tí a fi ọtí pò mọ́ ọn, lẹ́yìn náà a dì í ní -80°C fún wákàtí mẹ́rìnlélógún láti mú kí awọ ara náà yọ́. Lẹ́yìn tí ó bá ti yọ́, a fọ ​​awọ ara tó tó 1 cm2 nígbà mẹ́ta pẹ̀lú PBS, 0.6% sodium hypochlorite, àti 70% ethanol fún ìṣẹ́jú 20 ní ìgbà kọ̀ọ̀kan. Kí a tó yọ epidermis kúrò, a máa ń yọ ethanol tó kù kúrò nípa fífọ awọ ara náà ní ìgbà mẹ́ta nínú PBS tí a ti sọ di aláìlera. A máa ń gbin awọ ara náà sínú àwo 6 tí ó ní àwọ̀ nylon tí ó nípọn 0.45 μm (Merck-Millipore) lórí àti àwọn pádì ìfàmọ́ra mẹ́ta (Merck-Millipore) tí ó ní serum ẹran ọdẹ inú ọmọ inú oyun 3 ml (Sigma) tí a fi 10% Dulbecco's modified Eagle kún un. Medium (Dulbecco's Modified Eagle Medium – Aldrich Ltd.).
Wọ́n gbin àwọn ìfọ́mọ́lẹ̀ ìbílẹ̀ gẹ́gẹ́ bí a ṣe ṣàlàyé fún àwọn ìwádìí ìfarahàn biofilm. Lẹ́yìn tí wọ́n ti ṣe àgbékalẹ̀ biofilm náà lórí awo ara fún wákàtí 72, wọ́n fi biofilm náà sí ojú awọ ara nípa lílo ìdènà abẹ́rẹ́ tí a kò lè fọ̀, wọ́n sì yọ awo ara náà kúrò. Lẹ́yìn náà, wọ́n fi biofilm náà sí ojú awọ ara ẹlẹ́dẹ̀ fún wákàtí 24 sí i ní 37°C láti jẹ́ kí biofilm náà dàgbà kí ó sì lẹ̀ mọ́ awọ ẹlẹ́dẹ̀ náà. Lẹ́yìn tí biofilm náà bá ti dàgbà tí wọ́n sì so ó mọ́, wọ́n fi aṣọ ìbora 1.5 cm2, tí a fi omi tí a ti fọ̀ mọ́ ọn tẹ́lẹ̀, sí ojú awọ ara taara, wọ́n sì fi sínú rẹ̀ ní 37°C fún wákàtí 24. Wọ́n rí àwọn bakitéríà tí ó ṣeé fọ̀ nípa fífi àwọ̀ sí ojú ara nípa lílo PrestoBlue cell viability reagent (Invitrogen, Life Technologies, Paisley, UK) sí ojú apical ti gbogbo ìfọ́mọ́lẹ̀ náà kí wọ́n sì fi sínú rẹ̀ fún ìṣẹ́jú 5. Lo kámẹ́rà oní-nọ́ńbà Leica DFC425 láti ya àwọn àwòrán lórí microscope Leica MZ8 lẹ́sẹ̀kẹsẹ̀. A lo software Image Pro version 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD Image-Pro (mediacy.com)) lati ṣe iwọn awọn agbegbe ti o ni awọ pupa. A ṣe ayẹwo microscopy elekitironi bi a ti ṣalaye ni isalẹ.
A fi omi pò àwọn bakitéríà tí a gbìn ní alẹ́ kan 1:100 nínú omi Mueller-Hinton. A fi 200 μl ti ìbílẹ̀ kún awọ ara Whatman cyclopore (Whatman, Maidstone, UK) tí ó ní èéfín 0.2 μm, a sì fi bò ó lórí Mueller-Hinton agar. A fi àwọn àwo biofilm sínú igbóná ní 37°C fún wákàtí 72 láti jẹ́ kí biofilm tó dàgbà ṣẹ̀dá.
Lẹ́yìn ọjọ́ mẹ́ta tí biofilm bá ti dàgbà tán, a gbé ìbòrí onígun mẹ́rẹ̀ẹ̀rin 3 cm2 sí orí biofilm náà, a sì fi sínú ààrò ní 37°C fún wákàtí mẹ́rìnlélógún. Lẹ́yìn tí a bá ti yọ ìbòrí náà kúrò lórí biofilm náà, a fi 1 milimita PrestoBlue Cell Viability Reagent (Invitrogen, Waltham, MA) kún ojú biofilm kọ̀ọ̀kan fún ogún ìṣẹ́jú-àáyá. A gbẹ àwọn ojú náà kí a tó fi kámẹ́rà oní-nọ́ńbà Nikon D2300 (Nikon UK Ltd., Kingston, UK) ṣàkọsílẹ̀ àwọn àyípadà àwọ̀.
Ṣe àgbékalẹ̀ àgbékalẹ̀ alẹ́ lórí Mueller-Hinton agar, gbé àwọn àgbékalẹ̀ kọ̀ọ̀kan sínú omi Mueller-Hinton 10 milimita kí o sì fi sínú omi ìfọṣọ ní 37°C (100 rpm). Lẹ́yìn tí a fi sínú omi ní alẹ́, a fi omi pò ó nínú omi Mueller-Hinton ní ìwọ̀n 1:100, a sì rí 300 µl lórí awọ ara Whatman cyclopore yíká 0.2 µm (Whatman International, Maidstone, UK) lórí Mueller-Hinton agar, a sì fi sínú rẹ̀ ní ìwọ̀n 37°C láàrín wákàtí 72. A fi biofilm tí ó dàgbà sí ọgbẹ́ náà gẹ́gẹ́ bí a ti ṣàlàyé rẹ̀ ní ìsàlẹ̀ yìí.
Gbogbo iṣẹ́ pẹ̀lú àwọn ẹranko ni a ṣe ní Yunifásítì Manchester lábẹ́ ìwé àṣẹ iṣẹ́ tí Office of Animal Welfare and Ethical Review (P8721BD27) fọwọ́ sí àti ní ìbámu pẹ̀lú àwọn ìlànà tí Ilé Iṣẹ́ Àdúgbò tẹ̀ jáde lábẹ́ àtúnṣe ASPA ti ọdún 2012. Gbogbo àwọn òǹkọ̀wé tẹ̀lé ìlànà dídé. A lo àwọn eku C57BL/6j ọ̀sẹ̀ mẹ́jọ (Envigo, Oxon, UK) fún gbogbo àwọn ìwádìí in vivo. A fi isoflurane (Piramal Critical Care Ltd, West Drayton, UK) pa àwọn eku run, a sì fá wọn, a sì fọ̀ wọ́n mọ́. Lẹ́yìn náà, a fún eku kọ̀ọ̀kan ní ọgbẹ́ ìyọkúrò 2 × 6 mm nípa lílo Stiefel biopsy punch (Schuco International, Hertfordshire, UK). Fún àwọn ọgbẹ́ tí biofilm ti kó bá, fi biofilm colonial ti a gbìn sí awo ara fún wákàtí 72 gẹ́gẹ́ bí a ti ṣàlàyé rẹ̀ lókè sí awọ ara ti ọgbẹ́ náà nípa lílo ìdènà inoculation lẹ́sẹ̀kẹsẹ̀ lẹ́yìn ìpalára, kí o sì sọ awo ara náà nù. A fi omi ìdọ̀tí kan onígun mẹ́rin ti aṣọ ìbora ṣáájú láti mú kí ojú ọgbẹ́ náà tutu. A fi aṣọ ìbora sí ojú ọgbẹ́ kọ̀ọ̀kan taara, a sì fi 3M Tegaderm film (3M, Bracknell, UK) àti Mastisol liquid adhesive bo egbegbe rẹ̀ láti fi kún ìsopọ̀ rẹ̀. A fún Buprenorphine (Animalcare, York, UK) ní ìwọ̀n 0.1 mg/kg gẹ́gẹ́ bí oògùn analgesic. Pa àwọn eku ní ọjọ́ mẹ́ta lẹ́yìn ìpalára nípa lílo ọ̀nà Schedule 1, kí o sì yọ wọ́n kúrò, ya wọ́n sí méjì, kí o sì tọ́jú ibi tí ọgbẹ́ náà wà bí ó ṣe yẹ.
A ṣe àwọ̀ Hematoxylin (ThermoFisher Scientific) àti eosin (ThermoFisher Scientific) gẹ́gẹ́ bí ìlànà olùpèsè. A lo ẹ̀rọ Image Pro version 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD) láti ṣe ìwọ̀n agbègbè ọgbẹ́ àti ìtún-ẹ̀rọ náà.
A yọ awọn apakan ti ara kuro ninu xylene (ThermoFisher Scientific, Loughborough, UK), a tun fi ethanol ti a ti yan 100–50% pada, a si fi sinu omi ti a ti yọ ion kuro fun igba diẹ (ThermoFisher Scientific). A ṣe Immunohistochemistry nipa lilo ohun elo VectaStain Elite ABC PK-6104 (Vector Laboratories, Burlingame, CA) gẹgẹbi ilana olupese naa. A fi omi pò awọn aporo akọkọ si awọn neutrophils NIMP-R14 (Thermofisher Scientific) ati awọn macrophages Ms CD107b Pure M3/84 (BD Biosciences, Wokingham, UK) ni iwọn 1:100 ninu omi idena a si fi kun si oju ti a ge, atẹle nipa lilo ohun elo antibodies meji Anti-, VectaStain ABC ati Vector Nova Red Peroxidase (HRP) substrate kit (Vector Laboratories, Burlingame, CA) a si fi hematoxylin ṣe atunṣe wọn. A gba awọn aworan naa nipa lilo ẹrọ mikroskopu Olympus BX43 ati kamẹra oni-nọmba Olympus DP73 (Olympus, Southend-on-Sea, UK).
A fi glutaraldehyde 2.5% àti formaldehyde 4% nínú 0.1 M HEPES (pH 7.4) fún wákàtí 24 ní 4°C. A fi ethanol tí a ti ṣe àtúnṣe gbẹ àwọn àpẹẹrẹ náà, a sì fi CO2 gbẹ wọ́n nípa lílo Quorum K850 critical point dryer (Quorum Technologies Ltd, Loughton, UK) àti sputter tí a fi gold-palladium alloy bò nípa lílo Quorum SC7620 mini sputterer/glow discharge system. A fi FEI Quanta 250 scanning electron microscope (ThermoFisher Scientific) ya àwòrán àwọn àpẹẹrẹ náà láti fojú inú wo ojú àárín ọgbẹ́ náà.
A fi iodide Toto-1 (2 μM) sí ojú ọgbẹ́ eku tí a yọ kúrò, a sì fi sínú iná fún ìṣẹ́jú 5 ní 37 °C (ThermoFisher Scientific) a sì fi Syto-60 (10 μM) tọ́jú rẹ̀ ní 37 °C (ThermoFisher Scientific). A fi Leica TCS SP8 ṣe àwòrán Z-stack ìṣẹ́jú 15.
A ṣe àkójọ àwọn ìwádìí àtúnṣe ẹ̀dá àti ìmọ̀ ẹ̀rọ nípa lílo sọ́fítíwè Graphpad Prism V9 (GraphPad Software, La Jolla, CA). A lo ìṣàyẹ̀wò ìyàtọ̀ ọ̀nà kan pẹ̀lú ọ̀pọ̀lọpọ̀ ìfiwéra nípa lílo ìdánwò lẹ́yìn hoc ti Dunnett láti dán àwọn ìyàtọ̀ láàrín ìtọ́jú kọ̀ọ̀kan àti ìtọ́jú tí kò ní ipa lórí àwọn kòkòrò àrùn. A kà iye p <0.05 sí pàtàkì.
A kọ́kọ́ ṣe àyẹ̀wò bí àwọn ohun èlò ìpara fàdákà jẹ́lì ṣe ń ṣiṣẹ́ dáadáa sí àwọn ilé ìtajà fíìmù bíófíìmù Staphylococcus aureus àti Pseudomonas aeruginosa in vitro. Àwọn ohun èlò ìpara fàdákà ní onírúurú ọ̀nà fàdákà: àwọn ohun èlò ìpara fàdákà ìbílẹ̀ ń mú àwọn ions Ag1+ jáde; àwọn ohun èlò ìpara fàdákà, tí ó lè mú àwọn ions Ag1+ jáde lẹ́yìn tí a bá fi EDTA/BC kún un, lè pa biofilm matrix run kí ó sì fi àwọn bakitéríà hàn sí fàdákà lábẹ́ ipa antibacterial ti fàdákà. àwọn ions15 àti àwọn ohun èlò ìpara tí ó ní iyọ̀ Ag tí ó ní oxygen tí ó ń mú àwọn ions Ag1+, Ag2+ àti Ag3+ jáde. A fi ìṣiṣẹ́ rẹ̀ wé pẹ̀lú ohun èlò ìpara tí kò ní antimicrobial tí a fi àwọn okùn gelled ṣe. A ṣe àyẹ̀wò àwọn bakitéríà tí ó ṣẹ́kù nínú biofilm ní gbogbo wákàtí 24 fún ọjọ́ 8 (Àwòrán 1). Ní ​​ọjọ́ 5, a tún fi 3.85 × 105S ṣe biofilm náà. Staphylococcus aureus tàbí 1.22×105P. aeruginosa láti ṣe àyẹ̀wò bí biofilm ṣe ń padà bọ̀ sípò. Ní ìfiwéra pẹ̀lú àwọn aṣọ ìbora tí kìí ṣe ti àwọn kòkòrò àrùn, àwọn aṣọ ìbora Ag1+ ní ipa díẹ̀ lórí agbára ìṣiṣẹ́ bakitéríà nínú àwọn aṣọ ìbora Staphylococcus aureus àti Pseudomonas aeruginosa biofilms láàárín ọjọ́ márùn-ún. Ní ìyàtọ̀ sí èyí, àwọn aṣọ ìbora tí ó ní iyọ̀ Ag1+ + EDTA/BC tí ó ní oxygen àti àwọn iyọ̀ Ag1+ + EDTA/BC múná dóko nínú pípa bakitéríà nínú biofilm láàrín ọjọ́ márùn-ún. Lẹ́yìn tí a fi àwọn bakitéríà planktonic fún wọn ní àtẹ̀gùn lẹ́ẹ̀kan sí i ní ọjọ́ karùn-ún, a kò rí àtúnṣe biofilm náà (Àwòrán 1).
Ìwọ̀n àwọn bakitéríà tó ṣeé gbé nínú Staphylococcus aureus àti Pseudomonas aeruginosa biofilms lẹ́yìn ìtọ́jú pẹ̀lú àwọn aṣọ ìbora fàdákà. A fi àwọn aṣọ ìbora fàdákà tàbí àwọn aṣọ ìbora tí kò ní ipa lórí àwọn bakitéríà tọ́jú àwọn agbo ẹran ara tí wọ́n ní ìfowópamọ́ fàdákà, a sì ń pinnu iye àwọn bakitéríà tó ṣeé gbé nínú rẹ̀ ní gbogbo wákàtí mẹ́rìnlélógún. Lẹ́yìn ọjọ́ márùn-ún, a tún fi 3.85×105S tún biofilm náà ṣe. Staphylococcus aureus tàbí 1.22×105P. A ṣe àwọn agbo ẹran ara tí ó ní ìfowópamọ́ fàdákà Pseudomonas aeruginosa lẹ́ẹ̀kọ̀ọ̀kan láti ṣe àyẹ̀wò ìpadàbọ̀sípò biofilm. Àwọn àwòrán fi àṣìṣe ìwọ̀n +/- hàn.
Láti fojú inú wo ipa tí àwọn aṣọ ìbora fàdákà ní lórí bí a ṣe lè ṣe é, a fi àwọn aṣọ ìbora sára àwọn aṣọ ìbora tí ó dàgbà tí a gbìn sí awọ ẹlẹ́dẹ̀ ex vivo. Lẹ́yìn wákàtí mẹ́rìnlélógún, a yọ aṣọ ìbora náà kúrò, a sì fi àwọ̀ aláwọ̀ búlúù tí ó ń ṣiṣẹ́ pọ̀ mọ́ ara rẹ̀, èyí tí àwọn bakitéríà alààyè yóò fi àwọ̀ pupa sí. Àwọn aṣọ ìbora tí a fi àwọn aṣọ ìbora tí a fi àwọn aṣọ ìbora tí a fi Ag oxysols ṣe tọ́jú jẹ́ àwọ̀ pupa, èyí tí ó fi hàn pé àwọn bakitéríà tí ó ṣẹ́kù wà nínú awọ ẹlẹ́dẹ̀ náà (Àwòrán 2A). Ní ​​ìyàtọ̀ sí èyí, aṣọ ìbora tí a fi àwọn aṣọ ìbora Ag oxysols ṣe tọ́jú jẹ́ àwọ̀ pupa ní pàtàkì, èyí tí ó fi hàn pé àwọn bakitéríà tí ó kù lórí awọ ẹlẹ́dẹ̀ náà jẹ́ bakitéríà tí kò ṣeé tọ́jú (Àwòrán 2B). A rí àwọ̀ àwọ̀ búlúù àti àwọ̀ pupa nínú àwọn aṣọ ìbora tí a fi àwọn aṣọ ìbora tí ó ní Ag1+ ṣe tọ́jú, èyí tí ó fi hàn pé àwọn bakitéríà tí ó ṣeé tọ́jú àti tí kò ṣeé tọ́jú wà nínú aṣọ ìbora náà (Àwòrán 2C), nígbà tí àwọn aṣọ ìbora EDTA/BC tí ó ní Ag1+ jẹ́ àwọ̀ pupa ní pàtàkì pẹ̀lú àwọn àmì pupa díẹ̀. Ó fi àwọn agbègbè tí aṣọ ìbora fàdákà kò ní ipa lórí wọn hàn (Àwòrán 2D). Ìwọ̀n àwọn agbègbè tí ó ṣiṣẹ́ (pinki) àti èyí tí kò ṣiṣẹ́ (bulu) fihàn pé àpò ìdarí náà jẹ́ 75% tí ó ṣiṣẹ́ (Àwòrán 2E). Àwọn aṣọ ìbora Ag1+ + EDTA/BC tí a ṣe bákan náà pẹ̀lú àwọn aṣọ ìbora Ag iyọ̀ tí ó ní oxygen, pẹ̀lú ìwọ̀n ìwàláàyè tó jẹ́ 13% àti 14%, lẹ́sẹẹsẹ. Aṣọ ìbora Ag1+ náà dín agbára ìṣiṣẹ́ bakitéríà kù nípa 21%. Lẹ́yìn náà, a ṣe àkíyèsí àwọn ohun èlò biofilm wọ̀nyí nípa lílo scanning electron microscopy (SEM). Lẹ́yìn ìtọ́jú pẹ̀lú aṣọ ìbora ìṣàkóso àti aṣọ ìbora Ag1+, a rí ìpele kan ti Pseudomonas aeruginosa tí ó bo awọ ẹlẹ́dẹ̀ (Àwòrán 2F,H), nígbà tí lẹ́yìn ìtọ́jú pẹ̀lú aṣọ ìbora Ag1+, a rí àwọn sẹ́ẹ̀lì bakitéríà díẹ̀ àti pé a rí àwọn sẹ́ẹ̀lì bakitéríà díẹ̀ ní ìsàlẹ̀. A lè kà àwọn okùn collagen sí ìṣètò àsopọ ti awọ ẹlẹ́dẹ̀ (Àwòrán 2G). Lẹ́yìn ìtọ́jú pẹ̀lú aṣọ ìbora Ag1+ + EDTA/BC, àwọn plaques bakitéríà àti àwọn plaques collagen lábẹ́ rẹ̀ hàn (Àwòrán 2I).
Fífi ojú ìwòye Pseudomonas aeruginosa biofilm lẹ́yìn ìtọ́jú fàdákà. (A–D) A fi ojú ìwòye bí bakitéríà ṣe lè ṣiṣẹ́ nínú àwọn fíìmù biofilm Pseudomonas aeruginosa biofilm tí a gbìn sí awọ ẹlẹ́dẹ̀ nípa lílo àwọ̀ PrestoBlue viability dye lẹ́yìn wákàtí 24 lẹ́yìn ìtọ́jú pẹ̀lú àwọ̀ fàdákà tàbí àwọ̀ tí kò ní ipa lórí àwọn kòkòrò àrùn. Àwọn bakitéríà alààyè jẹ́ pupa, kò ní agbára láti ṣiṣẹ́, awọ ẹlẹ́dẹ̀ sì jẹ́ aláwọ̀ búlúù. (E) Ìwọ̀n àwọn fíìmù biofilm Pseudomonas aeruginosa tí a gbìn sí awọ ẹlẹ́dẹ̀ (apá pupa) nípa lílo àyẹ̀wò electron microscopy Image Pro version 10 (FI) tí a sì fi àwọ̀ fàdákà tàbí àwọ̀ tí kò ní ipa lórí àwọn kòkòrò àrùn tọ́jú fún wákàtí 24. SEM scale bar = 5 µm. (J–M) Àwọn fíìmù biofilm colonial dàgbàsókè lórí àwọn àlẹ̀mọ́, a sì fi àwọ̀ PrestoBlue reactive dye bò wọ́n lẹ́yìn wákàtí 24 tí a fi àwọ̀ fàdákà kún un.
Láti mọ̀ bóyá ìfarakanra tó gún régé láàárín àwọn aṣọ ìbora àti àwọn aṣọ ìbora nípa lórí bí àwọn aṣọ ìbora náà ṣe ń ṣiṣẹ́, a fi àwọn aṣọ ìbora tí a gbé sórí ilẹ̀ títẹ́jú tọ́jú àwọn aṣọ ìbora náà fún wákàtí mẹ́rìnlélógún, lẹ́yìn náà a fi àwọn àwọ̀ tí ó ń ṣiṣẹ́ padà kùn wọ́n. Àwọ̀ biofilm tí a kò tọ́jú náà jẹ́ àwọ̀ pupa dúdú (Àwòrán 2J). Ní ​​ìyàtọ̀ sí àwọn aṣọ ìbora tí a fi àwọn iyọ̀ Ag tí ó ní atẹ́gùn tọ́jú (Àwòrán 2K), àwọn aṣọ ìbora tí a fi àwọn aṣọ ìbora tí ó ní Ag1+ tàbí Ag1+ + EDTA/BC tọ́jú fi àwọn ìdè aláwọ̀ pupa fihàn (Àwòrán 2L,M). Àwọ̀ pupa yìí fihàn wíwà àwọn bakitéríà tí ó ṣeé gbé, ó sì ní í ṣe pẹ̀lú agbègbè ìsopọ̀ nínú aṣọ ìbora náà. Àwọn agbègbè tí a rán wọ̀nyí ṣẹ̀dá àwọn àyè òkú tí ó jẹ́ kí bakitéríà nínú aṣọ ìbora náà wà láàyè.
Láti ṣe àyẹ̀wò bí àwọn ohun èlò ìtọ́jú fàdákà ṣe ń ṣiṣẹ́ nínú ara, a fi àwọn ohun èlò ìtọ́jú fàdákà tàbí ohun èlò ìtọ́jú fàdákà tàbí ohun èlò ìtọ́jú fàdákà tó nípọn tó yọ àwọn eku tí wọ́n ti kó àrùn S. aureus àti P. aeruginosa biofilms tí wọ́n ti dàgbà ṣe ìtọ́jú. Lẹ́yìn ọjọ́ mẹ́ta tí a ti lò ó, ìwádìí àwòrán macroscopic fi hàn pé àwọn egbò náà kéré sí i nígbà tí a fi ohun èlò ìtọ́jú fàdákà tí ó ní oxygen tọ́jú ní ìfiwéra pẹ̀lú àwọn ohun èlò ìtọ́jú fàdákà mìíràn (Àwòrán 3A-H). Láti fìdí àwọn àkíyèsí wọ̀nyí múlẹ̀, a kó àwọn egbò náà, a sì ṣe àyẹ̀wò agbègbè ọgbẹ́ náà, a sì ṣe àyẹ̀wò reepithelialization lórí àwọn apá àsopọ̀ hematoxylin àti eosin nípa lílo àwòrán software version 10 (Àwòrán 3I-L).
Ipa ti awọn aṣọ ìbora fadaka lori oju ọgbẹ ati atunse awọn ọgbẹ́ ti a ti kojọ pẹlu awọn fiimu biofilm. (A–H) Awọn sẹẹli kekere ti a ti kojọ pẹlu awọn fiimu biofilm ti Pseudomonas aeruginosa (A–D) ati Staphylococcus aureus (E–H) lẹhin ọjọ mẹta ti itọju pẹlu aṣọ ìbora ti ko ni egboogi-kokoro, aṣọ iyọ̀ Ag ti o ni atẹgun, aṣọ ìbora Ag1+, ati aṣọ ìbora Ag1+. Awọn aworan macroscopic aṣoju. awọn ọgbẹ́ awọn eku pẹlu aṣọ ìbora Ag1+ + EDTA/BC. (IL) Aṣoju ikolu Pseudomonas aeruginosa, awọn apakan histological ti a ti fi hematoxylin ati eosin kun, ti a lo lati ṣe iwọn agbegbe ọgbẹ́ ati isọdọtun epithelial. Iye agbegbe ọgbẹ́ (M, O) ati ipin ogorun reepithelialization (N, P) ti awọn ọgbẹ́ ti a ti kojọ pẹlu awọn fiimu biofilm Pseudomonas aeruginosa (M, N) ati Staphylococcus aureus (O, P) (fun ẹgbẹ itọju n = 12). Awọn aworan fihan aṣiṣe boṣewa +/- deede. * ìtumọ̀ p = < 0.05 ** ìtumọ̀ p = < 0.01; Ìwọ̀n Macroscopic = 2.5 mm, ìwọ̀n histological = 500 µm.
Ìwọ̀n ibi tí ọgbẹ́ wà nínú ọgbẹ́ tí a fi Pseudomonas aeruginosa biofilm ṣe àkóràn (Àwòrán 3M) ​​fihàn pé àwọn ọgbẹ́ tí a fi Ag oxysalts tọ́jú ní ìwọ̀n ọgbẹ́ tó jẹ́ 2.5 mm2 lápapọ̀, nígbà tí ìtọ́jú tí kì í ṣe ti àwọn kòkòrò àrùn ní ìwọ̀n ọgbẹ́ tó jẹ́ 3.1 mm2 lápapọ̀, èyí tí kì í ṣe òótọ́. dé ìwọ̀n ìṣirò (Àwòrán 3M). p = 0.423). Àwọn ọgbẹ́ tí a fi Ag1+ tàbí Ag1+ + EDTA/BC tọ́jú kò fi ìdínkù kankan hàn ní agbègbè ọgbẹ́ (3.1 mm2 àti 3.6 mm2, lẹ́sẹẹsẹ). Ìtọ́jú pẹ̀lú ìtọ́jú iyọ̀ Ag tí a fi oxygen ṣe mú kí ìtún-ẹ̀rọ-ara-ẹni-pada-sípò pọ̀ sí i ju ìtọ́jú tí kì í ṣe ti àwọn kòkòrò àrùn (34% àti 15%, lẹ́sẹẹsẹ; p = 0.029) àti Ag1+ tàbí Ag1+ + EDTA/BC (10% àti 11%) (Àwòrán 3N). , lẹ́sẹẹsẹ).
Àwọn ìṣẹ̀lẹ̀ kan náà ní agbègbè ọgbẹ́ àti àtúnṣe epithelial ni a rí nínú àwọn ọgbẹ́ tí a ti kó àrùn S. aureus biofilms (Àwòrán 3O). Àwọn aṣọ ìbora tí ó ní iyọ̀ fàdákà tí a ti fi oxygen ṣe dín agbègbè ọgbẹ́ kù (2.0 mm2) ní ìwọ̀n 23% ní ìfiwéra pẹ̀lú aṣọ ìbora tí kò ní antimicrobial (2.6 mm2), bó tilẹ̀ jẹ́ pé ìdínkù yìí kò ṣe pàtàkì (p = 0.304) (Àwòrán 3O). Ní ​​àfikún, agbègbè ọgbẹ́ nínú ẹgbẹ́ ìtọ́jú Ag1+ dínkù díẹ̀ (2.4 mm2), nígbà tí ọgbẹ́ tí a fi Ag1+ + EDTA/BC tọ́jú kò dín agbègbè ọgbẹ́ kù (2.9 mm2). Iyọ̀ atẹ́gùn ti Ag tún gbé àtúnṣe epithelial ti àwọn ọgbẹ́ tí a ti kó àrùn S. aureus biofilm (31%) ró sí i ju àwọn tí a fi aṣọ ìbora tí kò ní antimicrobial tọ́jú (12%, p = 0.003) (Àwòrán 3P). Ìmúra Ag1+ (16%, p = 0.903) àti ìmúra Ag+1 + EDTA/BC (14%, p = 0.965) fi àwọn ìpele ìtúnṣe epithelial tí ó jọra sí ìdarí hàn.
Láti fojú inú wo ipa tí àwọn ohun èlò ìtọ́jú fàdákà ní lórí matrix biofilm, a ṣe àwọ̀ ìpara iodide Toto 1 àti Syto 60 (Àwòrán 4). Iodide Toto 1 jẹ́ àwọ̀ tí a lè fi sẹ́ẹ̀lì ṣe tí a lè lò láti fi ojú inú wo àwọn ásíìdì nucleic extracellular dáadáa, èyí tí ó pọ̀ nínú EPS ti biofilms. Syto 60 jẹ́ àwọ̀ tí a lè fi sẹ́ẹ̀lì ṣe tí a lò gẹ́gẹ́ bí àtúnṣe16. Àkíyèsí Toto 1 àti iodide Syto 60 nínú àwọn ọgbẹ́ tí a fi biofilms ti Pseudomonas aeruginosa fún (Àwòrán 4A-D) àti Staphylococcus aureus (Àwòrán 4I-L) fihàn pé lẹ́yìn ọjọ́ mẹ́ta ti ìtọ́jú ìtọ́jú, EPS nínú biofilm náà dínkù gidigidi. Ó ní iyọ̀ tí a fi oxygen ṣe Ag àti Ag1+ + EDTA/BC. Àwọn ohun èlò ìtọ́jú Ag1+ láìsí àwọn èròjà antibiofilm afikún dín DNA tí kò ní sẹ́ẹ̀lì kù ní àwọn ọgbẹ́ tí a fi Pseudomonas aeruginosa fún ṣùgbọ́n wọn kò ṣiṣẹ́ dáadáa nínú àwọn ọgbẹ́ tí a fi Staphylococcus aureus fún.
Àwòrán ìfọ́mọ́ ojú ọgbẹ́ lẹ́yìn ọjọ́ mẹ́ta tí a fi ìtọ́jú pẹ̀lú àwọn ohun èlò ìtọ́jú tàbí fàdákà. Àwọn àwòrán Confocal ti Pseudomonas aeruginosa (A–D) àti Staphylococcus aureus (I–L) tí a fi Toto 1 (alawọ ewe) ṣe àwọ̀ láti fi wo àwọn ásíìdì nucleic extracellular, èyí tí ó jẹ́ ẹ̀yà ara àwọn pólímà biofilm extracellular. Láti fi àwọ̀ àwọn ásíìdì nucleic intracellular ṣe àwọ̀, lo Syto 60 (pupa). ásíìdì. P. Ṣíṣàyẹ̀wò microscopy electron ti àwọn ọgbẹ́ tí a fi Pseudomonas aeruginosa (E–H) àti Staphylococcus aureus (M–P) biofilms ṣe àwọ̀ lẹ́yìn ọjọ́ mẹ́ta tí a fi ìtọ́jú pẹ̀lú àwọn ohun èlò ìtọ́jú àti fàdákà. SEM scale bar = 5 µm. Confocal imaging scale bar = 50 µm.
Ìwádìí nípa lílo ohun èlò ìwádìí onímọ́-ẹ̀rọ fihàn pé àwọn eku tí a fi àwọn èròjà biofilm ti Pseudomonas aeruginosa fún abẹ́rẹ́ (Àwòrán 4E-H) àti Staphylococcus aureus (Àwòrán 4M-P) fún ní àwọn bakitéríà díẹ̀ nínú ọgbẹ́ wọn lẹ́yìn ọjọ́ mẹ́ta tí a ti fi gbogbo ìtọ́jú fàdákà ṣe.
Láti ṣe àyẹ̀wò ipa tí àwọn ohun èlò ìtọ́jú fàdákà ní lórí ìgbóná ọgbẹ́ nínú àwọn eku tí ó ní àkóràn biofilm, àwọn apá ọgbẹ́ tí ó ní àkóràn biofilm tí a fi ìtọ́jú ìṣàkóso tàbí ohun èlò ìtọ́jú fàdákà tọ́jú fún ọjọ́ mẹ́ta ni a fi àbàwọ́n immunohistochemical bo pẹ̀lú àwọn èròjà tí ó ṣe pàtàkì fún àwọn neutrophils àti macrophages. Ìpinnu iye neutrophils àti macrophages inú. àsopọ granulation. Àwòrán 5). Gbogbo ohun èlò ìtọ́jú fàdákà dín iye neutrophils àti macrophages kù nínú ọgbẹ́ tí ó ní àkóràn Pseudomonas aeruginosa ní ìfiwéra pẹ̀lú àwọn ohun èlò ìtọ́jú tí kò ní ipa lórí àwọn microbial lẹ́yìn ọjọ́ mẹ́ta ti ìtọ́jú. Síbẹ̀síbẹ̀, ìtọ́jú pẹ̀lú ohun èlò ìtọ́jú fàdákà tí a fi oxygenated salt dressing yọrí sí ìdínkù púpọ̀ nínú àwọn neutrophils (p = <0.0001) àti macrophages (p = <0.0001) ní ìfiwéra pẹ̀lú àwọn ohun èlò ìtọ́jú fàdákà mìíràn tí a dán wò (Àwòrán 5I,J). Bó tilẹ̀ jẹ́ pé Ag1+ + EDTA/BC ní ipa tí ó pọ̀ sí i lórí biofilm ọgbẹ́, ó dín ìwọ̀n neutrophil àti macrophage kù sí ìwọ̀n tí ó kéré sí ti ohun èlò ìtọ́jú Ag1+. A tún rí àwọn ọgbẹ́ díẹ̀ tí ó ní S. aureus biofilm lẹ́yìn tí a fi Ag (p = <0.0001), Ag1+ (p = 0.0008) àti Ag1++ EDTA/BC (p = 0.0043) oxisols tí a fi wéra pẹ̀lú ìṣàkóso. Irú àwọn ìṣẹ̀lẹ̀ kan náà ni a rí fún neutropenia. bandage (Àwòrán 5K). Síbẹ̀síbẹ̀, ìpara iyọ̀ Ag tí a fi oxygen ṣe nìkan fi ìdínkù pàtàkì hàn nínú iye macrophages nínú àsopọ granulation ní ìfiwéra pẹ̀lú ìṣàkóso nínú àwọn ọgbẹ́ tí a fi S. aureus biofilms ṣe (p = 0.0339) ṣe (Àwòrán 5L).
A ṣe iye àwọn Neutrophils àti macrophages nínú àwọn ọgbẹ́ tí a ti kó àrùn Pseudomonas aeruginosa àti Staphylococcus aureus biofilms lẹ́yìn ọjọ́ mẹ́ta tí a ti lò wọ́n pẹ̀lú ìtọ́jú tí kò ní ipa lórí àwọn kòkòrò àrùn tàbí àwọn ohun èlò ìtọ́jú fàdákà. A ṣe iye àwọn Neutrophils (AD) àti macrophages (EH) nínú àwọn apá àsopọ̀ tí a fi àwọn èròjà ìdènà tí ó wà fún àwọn neutrophils tàbí macrophages bò. Ìwọ̀n àwọn neutrophils (I àti K) àti macrophages (J àti L) nínú àwọn ọgbẹ́ tí a ti kó àrùn Pseudomonas aeruginosa (I àti J) àti Staphylococcus aureus (K àti L) biofilms. N = 12 fún ẹgbẹ́ kọ̀ọ̀kan. Àwọn àwòrán fi àṣìṣe déédé hàn, àwọn ìwọ̀n pàtàkì tí a fi wé ìtọ́jú tí kò ní ipa lórí bakitéríà, * ìtumọ̀ p = < 0.05, ** ìtumọ̀ p = < 0.01; *** ìtumọ̀ p = < 0.001; túmọ̀ sí p = < 0.0001).
Lẹ́yìn náà, a ṣe àyẹ̀wò ipa tí àwọn ìpara fàdákà ní lórí ìwòsàn tí kò ní àkóràn. A fi ìpara tí kò ní àkóràn tàbí ìpara fàdákà tọ́jú àwọn ọgbẹ́ tí kò ní àkóràn fún ọjọ́ mẹ́ta (Àwòrán 6). Láàrín àwọn ìpara fàdákà tí a dán wò, àwọn ọgbẹ́ tí a fi ìpara iyọ̀ tí a fi atẹ́gùn tọ́jú nìkan ló kéré sí àwọn àwòrán macroscopic ju àwọn ọgbẹ́ tí a fi ìpara tọ́jú lọ (Àwòrán 6A-D). Ìwọ̀n agbègbè ọgbẹ́ nípa lílo ìwádìí histological fihàn pé agbègbè ọgbẹ́ tí ó wà lẹ́yìn ìtọ́jú pẹ̀lú ìpara Ag oxysols jẹ́ 2.35 mm2 ní ìfiwéra pẹ̀lú 2.96 mm2 fún àwọn ọgbẹ́ tí a fi ìpara tọ́jú pẹ̀lú ẹgbẹ́ ìṣàkóṣo, ṣùgbọ́n ìyàtọ̀ yìí kò dé pàtàkì ìṣirò (p = 0.488) (Àwòrán 6I). Ní ​​ìyàtọ̀ sí èyí, a kò rí ìdínkù ní agbègbè ọgbẹ́ lẹ́yìn ìtọ́jú pẹ̀lú ìpara Ag1+ (3.38 mm2, p = 0.757) tàbí Ag1+ + EDTA/BC (4.18 mm2, p = 0.054) ní ìfiwéra pẹ̀lú ẹgbẹ́ ìṣàkóṣo. A ṣe akiyesi ilosoke ninu isọdọtun epithelial pẹlu aṣọ Ag oxysol ni akawe si ẹgbẹ iṣakoso (30% vs. 22%, lẹsẹsẹ), botilẹjẹpe eyi ko de pataki (p = 0.067), eyi ṣe pataki pupọ o si jẹrisi awọn abajade ti tẹlẹ. Aṣọ pẹlu oxysols n mu ki atun-epithelial pada sipo. -Epithelization ti awọn ọgbẹ́ ti ko ni àkóràn17. Ni idakeji, itọju pẹlu awọn aṣọ Ag1+ tabi Ag1+ + EDTA/BC ko ni ipa tabi fihan idinku re-epithelialization ni akawe si iṣakoso.
Àkóbá ìtọ́jú ọgbẹ́ fàdákà lórí ìwòsàn ọgbẹ́ nínú àwọn eku tí kò ní àkóràn pẹ̀lú yíyọ gbogbo rẹ̀ kúrò pátápátá. (AD) Àwọn àwòrán macroscopic tó dúró fún ọgbẹ́ lẹ́yìn ọjọ́ mẹ́ta tí a ti lò pẹ̀lú ìtọ́jú tí kò ní ipa lórí àwọn kòkòrò àrùn àti ìtọ́jú fàdákà. (EH) Àwọn apá ọgbẹ́ tó dúró fún àwọ̀ tí a fi hematoxylin àti eosin ṣe. A ṣírò ìwọ̀n agbègbè ọgbẹ́ (I) àti ìpín ọgọ́rùn-ún ti ìtọ́jú (J) láti inú àwọn apá histological ní àárín ọgbẹ́ náà nípa lílo software ìṣàyẹ̀wò àwòrán (n = 11–12 fún ẹgbẹ́ ìtọ́jú kọ̀ọ̀kan). Àwọn àwòrán fi àṣìṣe ìwọ̀n +/- hàn. * túmọ̀ sí p = <0.05.
Silver ní ìtàn pípẹ́ ti lílo gẹ́gẹ́ bí ìtọ́jú antimicrobial nínú ìwòsàn ọgbẹ́, ṣùgbọ́n ọ̀pọ̀lọpọ̀ onírúurú àwọn ìgbékalẹ̀ àti ọ̀nà ìfijiṣẹ́ lè yọrí sí ìyàtọ̀ nínú agbára antimicrobial 18. Jù bẹ́ẹ̀ lọ, àwọn ànímọ́ antibiofilm ti àwọn ètò ìfijiṣẹ́ fadaka pàtó kò yé ni kikun. Bó tilẹ̀ jẹ́ pé ìdáhùn ìdènà ajẹ́sára olùgbàlejò jẹ́ èyí tó gbéṣẹ́ díẹ̀ sí bakitéríà planktonic, ó sábà máa ń dín agbára kù sí biofilms19. Àwọn macrophages máa ń fa phagocytose sínú bakitéríà planktonic, ṣùgbọ́n nínú biofilms, àwọn sẹ́ẹ̀lì tí a kojọpọ máa ń fa àwọn ìṣòro mìíràn nípa dídí ìdáhùn ìdènà olùgbàlejò kù sí ìwọ̀n tí àwọn sẹ́ẹ̀lì ajẹ́sára lè faragbá apoptosis kí wọ́n sì tú àwọn ohun tí ó lè fa ìgbóná ara jáde láti mú kí ìdáhùn ìdènà ajẹ́sára pọ̀ sí i20. A ti ṣàkíyèsí pé àwọn leukocytes kan lè wọ inú biofilms21 ṣùgbọ́n wọn kò lè fagocytose bakitéríà nígbà tí ààbò yìí bá ti bàjẹ́22. Ọ̀nà gbogbogbòò ni a gbọ́dọ̀ lò láti ṣe àtìlẹ́yìn fún ìdáhùn ìdènà ajẹ́sára olùgbàlejò lòdì sí àkóràn biofilm ọgbẹ́. Pípa ọgbẹ́ run lè ba biofilm jẹ́ ní ti ara kí ó sì mú ọ̀pọ̀lọpọ̀ ẹrù biofilm kúrò, ṣùgbọ́n ìdáhùn ìdènà ajẹ́sára olùgbàlejò lè má ṣiṣẹ́ lórí biofilm tí ó kù, pàápàá jùlọ tí ìdáhùn ìdènà ajẹ́sára olùgbàlejò bá bàjẹ́. Nítorí náà, àwọn ìtọ́jú antimicrobial bíi silver dressings lè ṣètìlẹ́yìn fún ìdáhùn ààbò ara ẹni àti láti mú àwọn àkóràn biofilm kúrò. Ìṣètò, ìfọkànsí, ìyọ́, àti ìpèsè ìpèsè lè ní ipa lórí bí silver ṣe ń ṣiṣẹ́ dáadáa. Ní àwọn ọdún àìpẹ́ yìí, ìlọsíwájú nínú ìmọ̀ ẹ̀rọ silver processing ti mú kí àwọn silver dressings wọ̀nyí múná dóko síi9,23. Bí ìmọ̀ ẹ̀rọ silver dressing ṣe ń tẹ̀síwájú, ó ṣe pàtàkì láti lóye bí àwọn silver dressing wọ̀nyí ṣe ń ṣàkóso àkóràn ọgbẹ́ àti, èyí tó ṣe pàtàkì jùlọ, ipa tí àwọn silver powerful wọ̀nyí ní lórí àyíká ọgbẹ́ àti ìwòsàn.
Nínú ìwádìí yìí, a fi ìwúlò àwọn aṣọ ìbora fàdákà méjì tí ó ti pẹ́ sí i wéra pẹ̀lú àwọn aṣọ ìbora fàdákà ìbílẹ̀ tí ó ń ṣe àwọn ion Ag1+ lòdì sí biofilms nípa lílo onírúurú in vitro àti in vivo models. A tún ṣe àyẹ̀wò ipa àwọn aṣọ ìbora wọ̀nyí lórí àyíká ọgbẹ́ àti ìwòsàn tí kò ní àkóràn. Láti dín ipa tí matrix ìfijiṣẹ́ náà ní kù, gbogbo aṣọ ìbora fàdákà tí a dán wò ni a fi carboxymethylcellulose ṣe.
Àyẹ̀wò àkọ́kọ́ wa lórí àwọn ohun èlò ìtọ́jú fàdákà wọ̀nyí lòdì sí àwọn ohun èlò ìtọ́jú àwọ̀ ara ti Pseudomonas aeruginosa àti Staphylococcus aureus fihàn pé, láìdàbí àwọn ohun èlò ìtọ́jú fàdákà Ag1+ ìbílẹ̀, àwọn ohun èlò ìtọ́jú fàdákà méjì, Ag1+ + EDTA/BC àti iyọ̀ Ag oxygenated, munadoko ní 5. Wọ́n ń pa àwọn bakitéríà biofilm ní ọ̀nà tó dára láàrín ọjọ́ díẹ̀. Ní àfikún, àwọn ohun èlò ìtọ́jú wọ̀nyí ń dènà àtúnṣe biofilm nígbà tí a bá tún fara hàn sí bakitéríà planktonic. Ohun èlò ìtọ́jú fàdákà Ag1+ ní fadaka chloride, ohun èlò ìtọ́jú fàdákà kan náà àti ipilẹ̀ bíi Ag1+ + EDTA/BC, ó sì ní ipa díẹ̀ lórí agbára ìtọ́jú bakitéríà nínú biofilm ní àkókò kan náà. Àkíyèsí pé ohun èlò ìtọ́jú fàdákà Ag1+ + EDTA/BC munadoko ju ohun èlò ìtọ́jú fàdákà Ag1+ tí ó ní matrix kan náà àti ohun èlò ìtọ́jú fàdákà kan náà lẹ́yìn èrò náà pé a nílò àwọn èròjà afikún láti mú kí agbára fàdákà chloride pọ̀ sí i lòdì sí biofilm, gẹ́gẹ́ bí a ti ròyìn níbòmíràn15. Àwọn àbájáde wọ̀nyí ti èrò náà lẹ́yìn pé BC àti EDTA ń kó ipa afikún sí ìlò aṣọ ìbora gbogbogbòò àti pé àìsí èròjà yìí nínú àwọn aṣọ ìbora Ag1+ lè ti ṣe àfikún sí àìṣe àfihàn agbára in vitro. A rí i pé àwọn aṣọ ìbora Ag iyọ̀ tí ó ní oxygen tí ń ṣe àwọn ions Ag2+ àti Ag3+ fi agbára antibacterial tí ó lágbára ju Ag1+ lọ àti ní àwọn ìpele tí ó jọ Ag1+ + EDTA/BC. Síbẹ̀síbẹ̀, nítorí agbára redox gíga, kò ṣe kedere bí àwọn ions Ag3+ ṣe ń ṣiṣẹ́ àti bí ó ṣe munadoko sí àwọn biofilms ojú ọgbẹ́, nítorí náà ó yẹ kí a túbọ̀ kẹ́kọ̀ọ́. Ní àfikún, ọ̀pọ̀lọpọ̀ àwọn aṣọ ìbora onírúurú ló ń ṣe àwọn ions Ag1+ tí a kò dán wò nínú ìwádìí yìí. Àwọn aṣọ ìbora wọ̀nyí ní onírúurú àdàpọ̀ fàdákà, ìfọ́pọ̀, àti àwọn matrices ìpìlẹ̀, èyí tí ó lè ní ipa lórí ìfijiṣẹ́ àwọn ions Ag1+ àti bí wọ́n ṣe munadoko sí àwọn biofilms. Ó tún ṣe pàtàkì láti kíyèsí pé ọ̀pọ̀lọpọ̀ àwọn awoṣe in vitro àti in vivo ló wà tí a lò láti ṣe àyẹ̀wò agbára ìlò aṣọ ìbora ọgbẹ́ sí biofilms. Irú àwòrán tí a lò, àti iye iyọ̀ àti amuaradagba tí àwọn media tí a lò nínú àwọn awoṣe wọ̀nyí, yóò ní ipa lórí agbára ìlò aṣọ náà. Nínú àwòrán in vivo wa, a jẹ́ kí biofilm náà dàgbà nínú in vitro, lẹ́yìn náà a gbé e lọ sí ojú awọ ara ọgbẹ́ náà. Ìdáhùn ìdènà eku tó wà nínú eku náà gbéṣẹ́ díẹ̀ sí àwọn bakitéríà planktonic tí a fi sí ọgbẹ́ náà, èyí sì mú kí biofilm náà ṣiṣẹ́ bí ọgbẹ́ náà ṣe ń wo sàn. Fífi biofilm tó ti dàgbà sínú ọgbẹ́ dín agbára ìdènà ...
A tún rí i pé ìtọ́jú ara ní ipa lórí bí àwọn ohun èlò ìtọ́jú fàdákà ṣe ń ṣiṣẹ́ lórí àwọn ohun èlò ìtọ́jú tí a gbìn sínú àpò ìtọ́jú àti awọ ẹlẹ́dẹ̀. Ìfarakanra pẹ̀lú ọgbẹ́ náà jẹ́ pàtàkì fún ìṣiṣẹ́ antimicrobial ti ohun èlò ìtọ́jú náà24,25. Àwọn ohun èlò ìtọ́jú tí ó ní iyọ̀ Ag tí ó ní oxygen wà ní ìsopọ̀mọ́ra pẹ̀lú àwọn ohun èlò ìtọ́jú tí ó dàgbà, èyí tí ó yọrí sí ìdínkù pàtàkì nínú iye àwọn bakitéríà tí ó lè ṣiṣẹ́ nínú ohun èlò ìtọ́jú lẹ́yìn wákàtí mẹ́rìnlélógún. Ní ìyàtọ̀ sí èyí, nígbà tí a bá fi àwọn ohun èlò ìtọ́jú Ag1+ àti Ag1+ + EDTA/BC tọ́jú wọn, iye àwọn bakitéríà tí ó lè ṣiṣẹ́ ṣì wà. Àwọn ohun èlò ìtọ́jú wọ̀nyí ní àwọn ohun èlò ìtọ́jú ní gbogbo gígùn ohun èlò ìtọ́jú náà, èyí tí ó ń ṣẹ̀dá àwọn ibi tí ó ti kú tí ó ń dènà ìfarakanra pẹ̀lú ohun èlò ìtọ́jú náà. Nínú àwọn ìwádìí in vitro wa, àwọn ibi tí kò ní ìfarakanra wọ̀nyí dènà pípa àwọn bakitéríà tí ó lè ṣiṣẹ́ nínú ohun èlò ìtọ́jú náà. A ṣe àyẹ̀wò bí bakitéríà ṣe lè ṣiṣẹ́ lẹ́yìn wákàtí mẹ́rìnlélógún tí a ti lò ó; Bí àkókò ti ń lọ, bí ìtọ́jú náà ṣe ń kún sí i, ó lè dín ààyè tí ó ti kú kù, èyí tí ó ń dín ààyè tí ó wà fún àwọn bakitéríà tí ó lè ṣiṣẹ́ wọ̀nyí kù. Síbẹ̀síbẹ̀, èyí fi hàn pé ìṣètò ohun èlò ìtọ́jú náà ṣe pàtàkì, kì í ṣe irú fàdákà tí ó wà nínú ohun èlò ìtọ́jú náà nìkan.
Bó tilẹ̀ jẹ́ pé àwọn ìwádìí in vitro wúlò fún fífi àwọn ìmọ̀ ẹ̀rọ fàdákà tó yàtọ̀ síra wéra, ó tún ṣe pàtàkì láti lóye ipa tí àwọn aṣọ ìbora wọ̀nyí ní lórí biofilms in vivo, níbi tí àsopọ ara àti ìdáhùn àjẹ́mọ́ ara ń ṣe àfikún sí ìmúṣẹ àwọn aṣọ ìbora lòdì sí biofilms. A ṣe àkíyèsí ipa àwọn aṣọ ìbora wọ̀nyí lórí biofilms ọgbẹ́ nípa lílo scanning electron microscopy àti EPS coloring ti biofilm nípa lílo intracellular àti extracellular DNA dyes. A rí i pé lẹ́yìn ọjọ́ mẹ́ta ti ìtọ́jú, gbogbo aṣọ ìbora ló múná dóko ní dín DNA tí kò ní sẹ́ẹ̀lì kù nínú àwọn ọgbẹ́ tí biofilm ti ní àkóràn, ṣùgbọ́n aṣọ ìbora Ag1+ kò ṣiṣẹ́ dáadáa nínú àwọn ọgbẹ́ tí Staphylococcus aureus ti ní àkóràn. Scanning electron microscopy tún fihàn pé àwọn bakitéríà díẹ̀ ló wà nínú àwọn ọgbẹ́ tí a fi fàdákà tọ́jú, bó tilẹ̀ jẹ́ pé èyí hàn gbangba sí i pẹ̀lú oxygenated Ag salt dressing àti Ag1+ + EDTA/BC dressing ní ìfiwéra pẹ̀lú aṣọ ìbora Ag1+. Àwọn ìwádìí wọ̀nyí fihàn pé àwọn aṣọ ìbora fàdákà tí a dán wò ní oríṣiríṣi ipa lórí ìṣètò biofilm, ṣùgbọ́n kò sí ọ̀kan nínú àwọn aṣọ ìbora fàdákà tí ó lè pa biofilm run, èyí tí ó ń ṣètìlẹ́yìn fún àìní fún ọ̀nà gbogbogbòò sí ìtọ́jú àwọn àkóràn biofilm ọgbẹ́; lílo àwọn ẹ̀gbà ọwọ́ fàdákà. A máa ń fi ìpara gé ara kúrò kí a tó lè yọ ọ̀pọ̀lọpọ̀ ohun èlò ìtọ́jú kúrò.
Àwọn ọgbẹ́ onígbà pípẹ́ sábà máa ń wà ní ipò ìgbóná ara líle, pẹ̀lú àwọn sẹ́ẹ̀lì ìgbóná ara tó pọ̀ jù tí ó wà nínú àsopọ̀ ọgbẹ́ fún ìgbà pípẹ́, èyí tí ó ń fa ìbàjẹ́ àsopọ̀ àti pípa atẹ́gùn tí a nílò fún ìṣiṣẹ́ sẹ́ẹ̀lì àti iṣẹ́ tó dára nínú ọgbẹ́ náà. Àwọn biofilms ń mú kí àyíká ọgbẹ́ búburú yìí burú sí i nípa bíba ìwòsàn jẹ́ ní onírúurú ọ̀nà, títí bí ìdíwọ́ ìdàgbàsókè sẹ́ẹ̀lì àti ìṣípòpadà àti ṣíṣiṣẹ́ àwọn cytokines proinflammatory27. Bí àwọn ìpara fàdákà ṣe ń múná dóko sí i, ó ṣe pàtàkì láti lóye ipa tí wọ́n ní lórí àyíká ọgbẹ́ àti ìwòsàn.
Ó yani lẹ́nu pé, bó tilẹ̀ jẹ́ pé gbogbo àwọn ohun èlò ìpara fàdákà ní ipa lórí ìdàpọ̀ biofilm, àwọn ohun èlò ìpara fàdákà tí a fi oxygen ṣe nìkan ló mú kí ìtún-ẹ̀dọ̀-àtún-ẹ̀dọ̀-àrùn àwọn ọgbẹ́ wọ̀nyí pọ̀ sí i. Àwọn ìwádìí wọ̀nyí ń ṣètìlẹ́yìn fún àwọn àwárí wa tẹ́lẹ̀17 àti ti Kalan et al. (2017)28, èyí tí ó fi ààbò àti ìpalára tó dára hàn fún àwọn iyọ̀ fàdákà tí a fi oxygen ṣe, nítorí pé ìwọ̀n fàdákà tí ó dínkù múná dóko sí àwọn ohun èlò ìpara fàdákà.
Ìwádìí wa lọ́wọ́lọ́wọ́ tẹnu mọ́ ìyàtọ̀ nínú ìmọ̀ ẹ̀rọ fàdákà láàrín àwọn ìpara fàdákà àti ipa tí ìmọ̀ ẹ̀rọ yìí ní lórí àyíká ọgbẹ́ àti ìwòsàn tí kò ní àkóràn. Síbẹ̀síbẹ̀, àwọn àbájáde wọ̀nyí yàtọ̀ sí àwọn ìwádìí ìṣáájú tí ó fihàn pé ìpara Ag1+ + EDTA/BC mú kí àwọn pàrámítà ìwòsàn ti etí ehoro tí ó farapa nínú ara sunwọ̀n síi. Síbẹ̀síbẹ̀, èyí lè jẹ́ nítorí ìyàtọ̀ nínú àwọn àpẹẹrẹ ẹranko, àkókò ìwọ̀n, àti àwọn ọ̀nà ìlò bakitéríà29. Nínú ọ̀ràn yìí, a ṣe ìwọ̀n ọgbẹ́ ní ọjọ́ 12 lẹ́yìn ìpalára láti jẹ́ kí àwọn èròjà tí ń ṣiṣẹ́ nínú ìpara náà ṣiṣẹ́ lórí biofilm fún àkókò gígùn. Èyí ni a ṣètìlẹ́yìn láti inú ìwádìí kan tí ó fihàn pé àwọn ọgbẹ́ ẹsẹ̀ tí ó ní àkóràn tí a fi Ag1+ + EDTA/BC tọ́jú ní ìpele àkọ́kọ́ pọ̀ sí i lẹ́yìn ọ̀sẹ̀ kan ti ìtọ́jú, lẹ́yìn náà ní ọ̀sẹ̀ mẹ́ta tí ó tẹ̀lé e ti ìtọ́jú pẹ̀lú Ag1+ + EDTA/BC àti láàrín ọ̀sẹ̀ mẹ́rin ti lílo àwọn oògùn tí kìí ṣe antimicrobial. àwọn oògùn. Ìpara CMC láti dín ìwọ̀n ọgbẹ́ kù30.
Àwọn ìrísí àti ìfọ́pọ̀ fàdákà kan ti hàn tẹ́lẹ̀ pé ó lè mú kí ó jẹ́ sẹ́ẹ̀lì nínú àpò ìfọ́, ṣùgbọ́n àwọn àbájáde in vitro wọ̀nyí kìí sábà túmọ̀ sí àwọn àbájáde búburú nínú àpò ìfọ́. Ní àfikún, ìlọsíwájú nínú ìmọ̀ ẹ̀rọ fàdákà àti òye tó dára jù nípa àwọn àpò ìfọ́ fàdákà àti ìfọ́pọ̀ nínú àpò ìfọ́ ti yọrí sí ìdàgbàsókè ọ̀pọ̀lọpọ̀ àpò ìfọ́ fàdákà tí ó ní ààbò àti tí ó múná dóko. Síbẹ̀síbẹ̀, bí ìmọ̀ ẹ̀rọ àpò ìfọ́ fàdákà ṣe ń tẹ̀síwájú, ó ṣe pàtàkì láti lóye ipa tí àwọn àpò ìfọ́ wọ̀nyí ní lórí àyíká ọgbẹ́31,32,33. A ti ròyìn tẹ́lẹ̀ pé ìwọ̀n ìdàgbàsókè ti ìfàsẹ̀yìn-àtúnṣe bá ìwọ̀n tí ó pọ̀ sí i ti àwọn macrophages anti-inflammatory M2 ní ìfiwéra pẹ̀lú àpẹẹrẹ M1 pro-inflammatory. Èyí ni a ṣe àkíyèsí nínú àpẹẹrẹ eku kan tẹ́lẹ̀ níbi tí a ti fi àwọn àpò ìfọ́ fàdákà hydrogel wé pẹ̀lú silver sulfadiazine àti non-antimicrobial hydrogels34.
Àwọn ọgbẹ́ onígbà pípẹ́ lè fi ìgbóná ara hàn, a sì ti rí i pé wíwà àwọn neutrophils tó pọ̀ jù lè jẹ́ ewu fún ìwòsàn ọgbẹ́35. Nínú ìwádìí kan nínú àwọn eku tí wọ́n ti parẹ́ ní neutrophil, wíwà àwọn neutrophils máa ń fa ìfàsẹ́yìn padà. Wíwà àwọn neutrophils tó pọ̀ jù máa ń yọrí sí àwọn proteases tó pọ̀ àti àwọn ẹ̀yà atẹ́gùn tó ń ṣiṣẹ́, bíi superoxide àti hydrogen peroxide, èyí tó ní í ṣe pẹ̀lú ọgbẹ́ onígbà pípẹ́ àti tó ń wosan díẹ̀díẹ̀37,38. Bákan náà, bí a bá ń ṣàkóso àwọn ọgbẹ́ onígbà pípẹ́, tí a kò bá ṣàkóso wọn, ó lè fa ìwòsàn ọgbẹ́ tó pẹ́. Ìbísí yìí ṣe pàtàkì gan-an tí àwọn macrophages kò bá lè yípadà láti inú pro-inflammatory phenotype sí pro-healing phenotype, èyí tó máa ń yọrí sí pé àwọn ọgbẹ́ kò lè jáde kúrò ní ìpele ìgbóná ara tó pọ̀ jù, èyí sì máa ń mú kí àwọn ọgbẹ́ má lè jáde kúrò ní ìpele ìgbóná ara tó pọ̀ jù. A rí ìdínkù nínú àwọn neutrophils àti macrophages nínú àwọn ọgbẹ́ tó ní àkóràn biofilm lẹ́yìn ọjọ́ mẹ́ta tí a ti fi gbogbo àwọn ohun èlò ìtọ́jú fàdákà ṣe ìtọ́jú wọn, ṣùgbọ́n ìdínkù náà hàn gbangba pẹ̀lú àwọn ohun èlò ìtọ́jú iyọ̀ tó ní oxygen. Ìdínkù yìí lè jẹ́ àbájáde tààrà ti ìdáhùn àjẹ́mọ́ ara sí fàdákà, ìdáhùn sí ìdínkù ẹrù ìlera, tàbí ọgbẹ́ náà wà ní ìpele ìwòsàn lẹ́yìn náà, nítorí náà àwọn sẹ́ẹ̀lì àjẹ́mọ́ ara nínú ọgbẹ́ náà ń dínkù. Dídín iye àwọn sẹ́ẹ̀lì àjẹ́mọ́ ara nínú ọgbẹ́ náà lè mú àyíká tí ó dára fún ìwòsàn ọgbẹ́ dúró. Ọ̀nà ìgbésẹ̀ bí Ag oxysalts ṣe ń mú ìwòsàn tí kò ní àkóràn pọ̀ sí i kò ṣe kedere, ṣùgbọ́n agbára Ag oxysalts láti ṣe atẹ́gùn àti láti pa ìwọ̀n ìpalára ti hydrogen peroxide, olùdábòbò ìgbóná ara, lè ṣàlàyé èyí, ó sì nílò ìwádìí síwájú sí i17.
Àwọn ọgbẹ́ tí ó ní àkóràn tí kò gbóògùn tí kò gbóògùn máa ń jẹ́ ìṣòro fún àwọn dókítà àti àwọn aláìsàn. Bó tilẹ̀ jẹ́ pé ọ̀pọ̀lọpọ̀ aṣọ ìbora ló ń sọ pé ó munadoko fún àwọn kòkòrò àrùn, ìwádìí kì í sábà dá lórí àwọn kókó pàtàkì mìíràn tó ń nípa lórí àyíká ọgbẹ́. Ìwádìí yìí fihàn pé onírúurú ìmọ̀ ẹ̀rọ fàdákà ní ipa ìpakúpa kòkòrò àrùn tó yàtọ̀ síra, àti pé, ó ṣe pàtàkì, ipa tó yàtọ̀ síra lórí àyíká ọgbẹ́ àti ìwòsàn, láìsí àkóràn. Bó tilẹ̀ jẹ́ pé àwọn ìwádìí in vitro àti in vivo fi hàn pé ìpakúpa àwọn aṣọ ìbora wọ̀nyí ń tọ́jú àkóràn ọgbẹ́ àti gbígbé ìwòsàn lárugẹ, àwọn ìdánwò tí a kò ṣe pàtó ni a nílò láti ṣe àyẹ̀wò bí àwọn aṣọ ìbora wọ̀nyí ṣe munadoko tó ní ilé ìwòsàn.
Àwọn ìwádìí tí a lò àti/tàbí tí a ṣàyẹ̀wò nígbà ìwádìí yìí wà láti ọ̀dọ̀ òǹkọ̀wé tí ó báramu bí a bá béèrè fún un.